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为什么液相色谱基线严重漂移？

shenfengjuan

2019/11/30

情况是这样的：是摸好的条件，对照品和以前的样品没有发生这种情况。

样品使用50%乙醇溶解，流动相为水-乙腈-0.1%甲酸（两相均加），梯度洗脱，从13%的乙腈到60%的乙腈，基线出现上移时即为梯度变化的地方。波长270nm。angilent1260，自动进样，柱温30度。c-18柱15cm。

①怀疑是有色素干扰，但是之前的样品完全没有漂移。

②怀疑检测器灯能量不足，更换后没有变化。

③怀疑预柱问题，拆除预柱没有变化。

④不可能使流动相梯度问题，对照品没有问题。但如果跑完样品在跑对照品会漂。

⑤怀疑色谱柱，更换安捷伦柱第一针没有漂，第二针又出现漂移。

⑥样品澄清，应该没有叶绿素。

shenfengjuan

第1楼2019/11/30

你做对照的时候都没问题，但做完样品再做对照基线就飘了。所以我觉得应该是样品的问题，楼上说的PH可以考虑哈，但是你说条件都是摸好了都嘛，PH应该考虑在内了。我看你的图谱，响应值怎么这么低，根本没出峰嘛，都40多min了。一般基线飘可能会是：1、柱压不稳。2、柱子不干净了，有杂质。3、柱效降低，基本没柱效。4、柱温箱温度异常。5、泵液不均，可手动测一下泵的精确度。

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