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junxi2008
第1楼2019/12/20
问题表述的不太明确。你说的“注意我用纯甲醇冲柱子之前用水：甲醇=95：5的比例冲洗了系统和柱子至少一小时，流速也是1ml/min。”是在压力120bar之前，还是90bar之前？感觉问题不大。磷酸盐浓度不算大，用纯甲醇冲之前最好用5-10%甲醇冲半小时柱子，再用纯甲醇，但是进缓冲盐流动相时候，一定再用5-10%甲醇过渡一下。我个人认为用甲醇多冲一会压力应该会降低，可能是柱子没平衡好。至于基线不平，首先应多平衡一会，缓冲盐流动相至少20倍柱体积平衡。再者注意管路中是否有气泡，充分PURGE.
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