1.水溶性的体积排阻柱一般选择用缓冲盐做流动相,选用纯水做流动相不太合适,这个可以可以跟色谱柱的生产厂家(比如我,嘿...)沟通下。
2.样品溶剂一般都是小分子溶液,G4000孔径在450A,即使有溶剂峰也只可能是在最后出来,如果排除色谱柱的问题就只可能是你的样品有问题了。
3.按你的单标分子量算,在SEC上,即使不能完全分离也至少是部分分离。样品混合后的主峰保留时间与前两张都对不上,要么色谱柱有问题,要么没有平衡好。
4.最后就是样品问题了,我觉得你样品有问题的可能性比较大。
现有的这两个样品用G4000分离,孔径有点大了~ 供参考~