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关于HPLC检测dextran的问题

测试版面

  • 我目前在用HPLC检测两个分子量(11万和29万)的dextran,出来的谱图非常奇怪,两者单一组分的图均有多个峰出现,但又不像溶剂峰,而且出峰时间非常接近,于是我将两者混溶后再次进样,分开,未分开我也不能确定,希望高手帮我解答一下,急……图07是11万的,图08是29万分子量的,0708混合样是两者混合的。07的浓度是2mg/ml,08 1mg/mg,0708 1mg/ml.用的是WATERS HPLC仪器,G4000凝胶柱,进样量10UL,示差检测,柱温35度,流动相为娃哈哈瓶装水,流速1ml/min.
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  • junxi2008

    第1楼2020/02/17

    1.水溶性的体积排阻柱一般选择用缓冲盐做流动相,选用纯水做流动相不太合适,这个可以可以跟色谱柱的生产厂家(比如我,嘿...)沟通下。
    2.样品溶剂一般都是小分子溶液,G4000孔径在450A,即使有溶剂峰也只可能是在最后出来,如果排除色谱柱的问题就只可能是你的样品有问题了。
    3.按你的单标分子量算,在SEC上,即使不能完全分离也至少是部分分离。样品混合后的主峰保留时间与前两张都对不上,要么色谱柱有问题,要么没有平衡好。
    4.最后就是样品问题了,我觉得你样品有问题的可能性比较大。
    现有的这两个样品用G4000分离,孔径有点大了~ 供参考~

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