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胰岛素的液相问题

carnivore

2020/02/17

我现在需要做高效液相检测胰岛素，2010版中国药典的方法如下：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（5～10μm）；0.2mol/L硫酸盐缓冲液（取无水硫酸钠28.4g，加水溶解后，加磷酸2.7ml，乙醇胺调节pH值至2.3，加水至1000ml）-乙腈（74∶26）为流动相，柱温为40℃；检测波长为214nm。
我有以下3个问题：
1.关于0.2mol/L硫酸盐缓冲液配制，是不是错了，应该先定容1000ml，再调节pH？
2.关于色谱柱，文献中大多采用ODS柱，实验室的色谱柱为Hipersil BDS C18柱，我是否能用？
3.查到Hipersil BDS C18的pH适用范围为2-9，如果流动相中0.2mol/L硫酸盐缓冲液的pH为2.3，对柱子的损害性较大吗？

carnivore

第1楼2020/02/17

我通常的操作是先定容然后调pH；至于BDS色谱柱，我没用过，不过据说适用于测定碱性化合物，你可以试一试在该色谱条件下药物峰形如何，我用药典条件ODS色谱柱峰形良好，保留时间6-7分钟；BDS色谱柱耐酸性良好，pH2.3应该没问题

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