中药采用加样回收率测定方法问题，请教大家！

xleif

2020/02/18

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中药加样回收率的问题？

对照品溶液精密称取氢溴酸东莨菪碱10.18mg，置10ml容量瓶中，加0.07mol/L磷酸钠

1.
对照品溶液精密称取氢溴酸东莨菪碱10.18mg，置10ml容量瓶中，加0.07mol/L磷酸钠溶液（用磷酸调pH至6.0）使溶解，并稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含1.018mg的溶液（东莨菪碱重量=氢溴酸东莨菪碱/1.445）。
2.
采用加样回收率测定方法，精密量取已知含量的样品2.5ml（即为供试品溶液取样量5ml的一半，已知含量为0.077mg/ml），精密加入上述对照品0.1945mg（与加入的样品含量之比大概为1：1）置锥形瓶中，加入2mol/L盐酸溶液15ml，超声处理（功率250W，频率 40kHz）30分钟，放冷，滤过，滤渣和滤器用2mol/L盐酸溶液分数次洗涤，合并滤液和洗液，用浓氨试液调节pH值至9，用三氯甲烷振摇提取4次，每次15ml，合并三氯甲烷液，回收容剂至干，残渣用0.07mol/L磷酸钠溶液（用磷酸调pH至6.0）溶解并移至5ml量瓶中，稀释至刻度，摇匀，即得。

我的计算公式为：样品峰面积×10.18mg×98%×2倍稀释÷对照品峰面积÷2.5ml÷10倍稀释÷1.445

我用的是岛津的液相机子，检测波长216nm，流速0.8ml/min，柱温25度

我的对照品峰面为：
18052658
加样回收样品峰面积为：
5932063
5935093
5854137.5
5772061
5855818.5
5900182.5
我的计算公式有没有错误，为什么加样回收率那么不好，请大家分析一下原因。

色谱柱：Promosil C18（250×4.6mm，5μm，）；流动相：0．07mol/L磷酸钠溶液 (用磷酸调 pH值至6.0，含0.0175mol/L十二烷基硫酸钠)-乙腈 (2：1)；流速：0.8ml/min；检测波长：216nm；柱温：25℃；进样量：10ul。
提取过程一直是按照同一方法提取，含量测定一直稳定，另外，没有测过最终的pH值。

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第1楼2020/02/18

回收率%=（C-A）/B×100%

式中 A为供试品所含被测成分量；B为加入对照品量；C为实测值。

楼主的上述回收率测定中，造成回收率不好的地方有：
1、超声时间和功率是否能把全部东莨菪碱溶解出来；
2、用三氯甲烷振摇提取4次能否全部提取出来，提取条件选择时候是否需做提取5次、提取6次的比较；
3、“残渣用0.07mol/L磷酸钠溶液（用磷酸调pH至6.0）溶解并移至5ml量瓶中，稀释至刻度，摇匀，即得。”这个步骤中定容的溶液是否太少了，使用比5ml量少的溶液（因为后面还要定容，所以肯定比5ml少）是否能把残渣全部溶解，能分多次溶解吗？应该也要用溶剂洗涤蒸发皿几次吧？