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高效液相色谱中流动相常用的缓冲盐有哪些?各自的最大吸收值是多少nm?

xleif

2020/03/03

最近在做异喹啉-5-磺酸的有关物质方法学，想找到合适的流动相和检测波长。用紫外扫了下波长，在216nm处有最大吸收，在271nm处有第二大吸收，很多流动相在216nm处也会有吸收，会不会影响检测结果啊？应该选择什么波长和流动相呢？另外有没有相关文献或资料介绍常用流动相（缓冲盐溶液）的最大吸收波长及选择方法？

xleif

第1楼2020/03/03

波长最好是271，如果一定要用216的话有机相最好用乙腈。因为甲醇截至波长是220，而乙腈是190，不过即使用乙腈也会有一点影响……缓冲盐的话用磷酸盐，就能涵盖大部分的PH了。另外，你说的20%有机相只有一个杂质峰的问题，改变流动相比例确实只能改变出峰时间，但是，你要考虑时间长短的问题，20%对于没检测到那个杂质峰来将可能极性比较小，它在柱子上吸附的较好，保留时间过长，长到超过你那针的截止时间了。

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