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我在做方法开发的时候，用乙腈和水作为流动相，在调整梯度的时候发现，刚开始用 60%乙腈，RT为 2.5 分钟，调到 40%乙腈， RT没有变化， 30%也没有变化，一直调到 20%的时候， RT突然变到了约 13 分钟，请问这是什么原因 ?我用的是离子交换柱。

whrboy

2020/04/07

我在做方法开发的时候，用乙腈和水作为流动相，在调整梯度的时候发现，刚开始用 60%乙腈，RT为 2.5 分钟，调到 40%乙腈， RT没有变化， 30%也没有变化，一直调到 20%的时候， RT突然变到了约 13 分钟，请问这是什么原因 ?我用的是离子交换柱。

konika

第1楼2020/04/07

离子交换柱的保留时间主要由洗脱液的离子强度和 pH决定，你现在讲
的比较简单，需要把你的方法说的详细一点才能做具体的分析。譬如分析物是什
么情况，其含有极性电离基团和非极性基团是什么性质 ?离子交换柱是聚合物基
质还是硅胶基质 ?水相是什么缓冲盐 ?对于一根常用的 c18 柱，拿到一根新柱的时
候应该怎样进行活化及维护 ?为什么要这样做 ?

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