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做标曲的时候调零用的应当是用蒸馏水替代抗坏血酸吧？

ql7720326

2020/04/15

分别取1mL样品液，加入2.5mL磷酸缓冲液(200 mmol/L，pH6.6) 以及2.5mL 1g/100mL铁氰化钾溶液，混匀。50℃恒温水浴20min后加入2.5mL 10g/100mL三氯乙酸溶液，3500r/min 离心10min。取2.5mL上清液，加入2.5mL蒸馏水和0.5mL 0.1g/100mL三氯化铁溶液。静置10min后，在700nm波长检测吸光度。吸光度越大,说明还原能力越强。每个样品都做对应的空白背景值测定(即实验步骤中不加入铁氰化钾溶液，以蒸馏水替代)。以抗坏血酸(30～210 μg/mL)作标准曲线，还原能力用抗坏血酸当量AAE (ascorbic acid equivalents)表示，单位为 μg AAE/mL。
方法如上所示。
问题如下：
做标曲的时候调零用的应当是用蒸馏水替代抗坏血酸吧？
在测定样液（茶汤本身有颜色，且在测定波长中有吸光值）吸光度的时候，调零的时候应该用什么呢？蒸馏水代替显色剂（铁氰化钾），然后应当加入样液？
方法中说的空白背景值是这个意思吗？

junxi2008

第1楼2020/04/15

这个空白应该是标准曲线和样液的空白，两者都囊括了。解决颜色过深的问题，一是稀释样液，二是脱除色素。还有的办法就是用你的样液不加入显色剂，以蒸馏水代替然后测定，以这个值作为空白值，然后测样液后都减去这个空白值。

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