固相萃取柱应用案例

色谱耗材

2020/07/29

私聊

前处理综合讨论

动物组织中盐酸克仑特罗等4种β-激动剂药物残留检测（KEPNO MCX）

1.实验材料

1.1 固相萃取小柱：MCX(150mg/6mL)

1.2 四种β-激动剂药物：盐酸克仑特罗、沙丁胺醇、西马特罗、莱克多巴胺等4种β-激动剂药物。

2. 试料的制备

取空白样品，经过液液萃取初步处理后，添加适宜浓度的标准溶液作为空白添加试料。

3. 净化

依次用甲醇5mL、水5mL和30mmol/L盐酸5mL润洗固相萃取小柱，将上述备用液过柱，依次用水5mL、甲醇5mL淋洗，真空抽干，用4%氨化甲醇5mL洗脱MCX小柱，收集洗脱液于具塞玻璃试管中，50℃下氮气吹干。在样液过柱和洗脱过程中流速控制在1mL/min左右。

4. 衍生化及检测

将上述盛有残渣的具塞玻璃试管放入50℃烘箱中加热片刻，除去水分后，加入甲苯100mL和双三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA）100mL，涡旋振荡20s，密封玻璃塞，置于80℃恒温烘箱中加热1小时，冷却后加入300mL甲苯，作为试样溶液，供气相色谱-质谱分析。

5. 结果

5.1 回收率实验（精密度和准确度）

将猪肝空白样品经过液液萃取初步处理后，分别添加一定量的标准溶液，配制1μg/L、2μg/L、5μg/L、10μg/L和100μg/L五个浓度的试样溶液，每批次内同一浓度做5次平行实验，共4个批次（样品典型回收率色谱图见附图）。

猪肝中实验结果列表如下

添加浓度（μg/L）	回收浓度（μg/L）	平均回收值（μg/L）	平均回收率（%）	相对标准偏差（%）
1	0.75	0.72	72.40	5.93
	0.67
	0.72
	0.70
	0.78
2	1.62	1.63	81.30	1.23
	1.66
	1.60
	1.61
	1.64
5	4.02	4.24	84.80	4.16
	4.10
	4.27
	4.38
	4.43
10	8.24	8.45	84.45	2.81
	8.35
	8.77
	8.62
	8.25
100	90.24	9.12	91.15	2.86
	87.15
	91.77
	92.62
	93.95

5.2重复性实验（批间误差实验）：

猪肝中实验结果列表如下

批间	添加浓度（μg/L）
	1		2		5		10		100
	平均回收率%	RSD%	平均回收率%	RSD%	平均回收率%	RSD%	平均回收率%	RSD%	平均回收率%	RSD%
1	72.40	5.93	81.30	3.49	84.80	6.16	84.45	3.59	91.15	2.86
2	75.37	6.12	80.47	5.37	84.74	7.55	87.46	4.68	90.05	3.86
3	70.09	7.85	80.80	6.57	83.10	8.17	83.21	5.39	89.53	4.16
4	76.73	4.90	78.50	8.35	82.90	5.11	85.95	5.72	88.27	5.93
平均值	73.65	6.20	80.25	5.95	83.88	6.75	85.27	4.84	89.75	4.20
RSD%	12.95		10.79		9.43		7.00		5.75