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细胞传代注意事项

导演叫我趴下脸着地

2020/09/29
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细胞传代注意事项：

1、避免污染肯定是首位的，包括，1.细胞间的灭菌，培养基和血清都要经过过滤，2每个操作都不能在未盖盖的培养皿上面进行。3.吸取吹打PBS或者培养基的枪头都不可以与废液缸直接接触。

2、另一件重要的事情就是胰酶消化的程度了。消化太过会使细胞形态改变，消化不充分会使细胞会滞留在培养基上。

3、当然离心的转速和时间也很重要，这要视细胞的种类而定。

具体操作步骤如下：1.用5%酒精擦试超净台和双手，

2.备好培养瓶，取出细胞，喷酒精，消毒后放入超净台

3.吸走旧培养基，用PBS清洗，加入适量胰酶消化液,注意消化液的量，最佳消化温度37% ,一般消化Imin.

4. 显微镜下观察消化细胞，若细胞质回缩,细胞之间连接成片，表明此时消化完成，

5.加入培养液终止消化，吹打均匀，放入15mL离人管，离心时1300rpm,5min，新的培养基加入培养液，植入新的培养皿, 吹打均匀,继续培养.

附件：

细胞传代注意事项.docx

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