菌破壁离心，纯化酶

（1）用来破壁的液体可以用 PBS 缓冲液，pH 一般在 7.0 - 7.4 左右比较常见。是否加氯化钠要看你的具体需求，加的话浓度也需要根据实际情况调整。
（2）你的镍柱结合液和洗脱液配方看起来问题不大，但有时候可能需要根据实际情况进行微调。可以考虑检查一下各个成分的纯度是否达标。
（3）透析最好用缓冲液透析，用 PBS 可以，至于加不加盐也看你的酶的特性和后续实验需求。一般来说，如果酶比较稳定，不加盐也可以，但如果不确定，还是用有一定盐浓度的缓冲液更保险。
（5）如果担心测酶活时受缓冲液影响，可以尝试用不同的缓冲液或者不使用缓冲液进行对比实验，看看酶活的变化情况，从而确定缓冲液是否有影响。