问题描述：请问BEH Amide 色谱柱和C18色谱柱功效接近吗？金刚烷胺项目需要BEH Amide 色谱柱，是否可以用C18色谱柱代替BEH Amide 色谱柱？
解答：（1）BEH Amide 色谱柱是Waters公司推出的一款主要用于分析糖类（图5-15）等碳水化合物的柱子，采用BEH填料（Waters专利：亚乙基桥杂化颗粒）和酰胺键合相。BEH填料的热稳定性和耐受pH范围由于硅胶，酰胺基团相对氨基的稳定性更高（柱流失减少），寿命更长（不与还原糖发生化学反应，不产生席夫碱）。因此，BEH Amide柱本质上还是正相柱（适合极性物质），但可以用反相流动相（如乙腈和水）。因此，BEH Amide柱与反相柱C18（适合非/弱极性物质）功能上是有本质差别的，是完全不同的两种色谱柱。
（2）金刚烷胺（结构式）含有氨基，属于极性很强的化合物，在反相C18柱上很难保留，出峰时间靠前，很可能与一些样品中极性物质同时出峰，干扰目标物定性定量，用BEH Amide正相柱可以增加其保留时间，使目标物和杂质得到更好的分离度。
图5-15 BEH Amide柱分离糖类的色谱图
1—果糖；2—葡萄糖；3—蔗糖；4—麦芽糖；5—乳糖
（3）BEH Amide是一种新型正相色谱柱，使用时需要注意以下几点：
a.对于新柱子，先用50倍柱体积的乙腈/水（60/40）或初始流动相平衡色谱柱（以2.1μm×100mm色谱柱为例，柱体积为0.4mL，50倍柱体积相当于20mL，如果用0.5mL/min流速，需要40min）；
b.等度洗脱：进样前用20倍柱体积初始流动相平衡；梯度洗脱：每次进样前需要用10倍柱体积的初始流动相进行平衡，否则没有充分平衡好的色谱柱可能会出现保留时间波动；
c.流动相要求：流动相体系至少需要保证含有40%的有机溶剂（如乙腈）；尽量避免使用磷酸盐等缓冲盐体系（流动相有机溶剂比例高，容易造成缓冲盐析出），但可以使用磷酸；
d.样品溶剂尽量接近初始流动相组成比例，不能用丙酮溶解样品（除非系统配置了正己烷/四氢呋喃组件包）；
e.使用完色谱柱后要进行冲洗，最终要将其保存在至少含有5%的极性溶剂（如5%水）中，以保证色谱填料始终处于润湿状态。
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