第5楼2006/04/25
MK3酶标仪来做MTT实验。MTT是一种黄色的化学物质,而MTT实验的检测波长570nm是紫色物质的强吸收峰,因此在570nm时MTT的OD本应该是很小的(小于0.005)。但是经过实验,我们发现用的酶标仪测出的数值与这一理论相反,MTT液(10ulMTT+PBS)在570nm下的OD值达到了1.2左右,而MTT反应后生成的紫色物质在这个波长的OD值却很小。为证实我们所购买的MTT是否有质量问题,我们把相同的东西(MTT液及紫色反应物)拿到我们自己的紫外分光光度计上测,得到的结果与酶标仪测出的结果差异很大。在紫外分光光度计上,MTT在570nm下的OD值只有0.0037(酶标仪是1.2)。
下面两个图所检测的物质是完全一样的(是MTT与细胞反应后生成的紫色物质),随着细胞浓度的增大,在两个仪器上测得的结果相差越大,从文献报道来看,紫外分光光度计测出的结果才是正确的。
问题总结:酶标仪在紫色吸收峰(570nm)对黄色物质敏感、紫色物质不敏感,严重影响了实验结果的准确性。
第10楼2006/05/26
5楼的朋友你好!请问您是汕头大学的实验室吗?您的问题应该是滤光片设置问题,我在收到您的仪器后做了校正,仪器读数没有问题,也附带一张可能产生问题的说明。不知道您这边最近用的可好?如有问题请于我公司联系:
广东丹利科技有限公司
高峰:020-85510091
广州市龙口东路342-360号天诚广场312室
另外热电的MK3酶标仪质量应该是大家认同的,只是酶免之友软件是有些不敢恭维,但是现在上海热电正在着手改进,希望大家能够理解。另外有客户不能等待的可找上海思桥021-54500763或上海瑞美:021-63121662或上海科华联系,他们都有针对雷勃MK3酶标仪开发的相应软件,而且都非常简单实用。至于我公司只能提供免费的英文软件Ascent Software for Multiskan供大家使用,应该对检验检疫局或水产畜牧等用户比较适用,对于医院可能就不太合适了。
第11楼2006/06/05
我觉得一个酶标仪的操作真没什么复杂的。软件用不着太复杂---把一个简单的酶标仪操作弄得复杂起来真是得不偿失。
就拿acent multiscan来说吧,其实把各个孔的吸光度值列出来就足够了。那些什么输入标准样浓度、定义样品等等这类纯粹是在折磨用户。人家手里有excel和Spss,根本不需要用你这个酶标仪来帮他们算浓度。
我单位买的酶标仪,thermo的工程师讲了一整天,累得口干舌燥,但用户能记住吗?能一下子就学会吗?
其实还真不如把最简单的操作教给他们就行了:把所有的96个孔都定义为sample,管它里面有没有样品、是样品还是标准样,打出来OD值拿回去自己去算嘛。
顺便还要骂一下thermo,搞生化的用酶标仪最需要的就是570nm的滤光片,可你们的酶标仪就偏偏不配这个滤光片,故意难为客户吗?我成天遇见那些可怜的研究生们到处打听哪有带570nm滤光片的酶标仪。