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色谱柱怎么验收

阿尼尼

2021/10/08
冲锋队

液相色谱（LC）

我们买回一根色谱柱后，打开包装首先看到的是它的检验报告，这几张纸被打开看了一下然后就永远地留在了包装盒内，因为对我们一线实验人员来说用处不大，那么这张纸有什么意义呢？我们大多知道的是测试液相色谱仪的标准色谱柱，其规格为4.60mmX250mmX5.0um，图1为标准柱的参数。那么该类柱子用作“标准柱”的要求是什么呢？再往外延伸，其它常规的色谱柱销售前是按照什么标准来验收合格，然后再放心交给实验人员使用的呢？

衡量色谱柱性能的重要参数有以下几点：柱效，以萘峰理论板数表示；色谱峰对称性，以萘峰拖尾因子来表示；柱压降。具体实验操作如下。

连接高效液相色谱仪系统，流动相为甲醇：水（85：15），检测器波长设定为254nm，恒温箱设定为30℃，进样量10ul，待系统稳定。这时精密称取10.0mg尿嘧啶和100.0mg萘，分别置于100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，配成母液。取10mL母液置于10mL容量瓶中，用流动相定容至刻度，得到含1.0x10^-5g/mL尿嘧啶、1.0x10^-4g/mL萘标准溶液。系统稳定后，进样萘的标准溶液，流速根据表2中色谱柱相应的规格设置，得到的色谱图按下式计算萘的理论板数，n=5.54(t_R/W_h/2)²（式中:n-理论板数；t_R-保留时间，单位为min；W_h/2-半高峰宽，单位为min），示意图见图A1。按下公式计算色谱峰拖尾因子，T=W_h/0.05/2d_L（式中:T-拖尾因子; W_h/0.05-0.05峰高处的峰宽，单位为min; d_L-峰极大至前伸沿之间的距离，单位为min），见示意图A2。

表2 不同规格色谱柱性能要求

最后是标准柱压降，将高效色谱仪中输液泵通过三通一端与精密压力表或超高压压力表连接，一端与色谱柱入口连接，色谱柱出口接入废液瓶。流动相为甲醇：水（85:15），流速根据表2中色谱柱相应的规格设置，压力稳定后，读取压力表示数P1。卸下标准柱，启动输液泵，压力稳定后读取压力表示数P2，P2与P1的差值即为标准柱压降。

在色谱柱的长期使用过程中，实验不顺利又找不到问题原因时，可以用上述方法检验色谱柱的性能，以排除是否是色谱柱的问题，加快试验进度。

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叮叮当当

第1楼2021/10/09

应助达人

干货啊，第三段流动相为？少了内容。

0

m3336169

第2楼2021/10/09

这个资料有点老了。其实色谱柱厂商各家都有测试标准，如果按照我们自己的来测，结果有差异，厂商会认这个结果吗？

0

叮叮当当

第3楼2021/10/11

应助达人

一般有资质的机构或第三方数据比较令人信服，自己测的作用主要是自检，其实标品什么的都统一起来结果差异是不大的
m3336169(m3336169) 发表:这个资料有点老了。其实色谱柱厂商各家都有测试标准，如果按照我们自己的来测，结果有差异，厂商会认这个结果吗？

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好吃的饺子

第4楼2021/10/11

学到了，我原来是直接用，看都没看??谢谢分享！

0

m3336169

第5楼2021/10/12

如果按照厂商随包装里面带的QC报告参数设置，其实参数没什么区别的。重要是适用于自己的分析物吧
叮叮当当(Insm_af467669) 发表:一般有资质的机构或第三方数据比较令人信服，自己测的作用主要是自检，其实标品什么的都统一起来结果差异是不大的

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叮叮当当

第6楼2021/10/12

应助达人

恩，正解。
m3336169(m3336169) 发表: 如果按照厂商随包装里面带的QC报告参数设置，其实参数没什么区别的。重要是适用于自己的分析物吧

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歪果仁zZ

第7楼2021/10/16

应助达人

非常棒的分享，下次买新主子试用一下，收藏！

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豆浆

第8楼2021/10/17

我想问一下每个色谱柱的说明书或者验收报告里都有色谱柱的活化方法吗老师？

0

豆浆

第9楼2021/10/17

我印象里没人看色谱柱的报告？

0

豆浆

第10楼2021/10/17

好多钱买的柱子做完项目就搁置了，太可惜了

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