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液相色谱测海水氨基酸，不出峰，求助

  • Insp_b50fe842
    2022/08/16
    • 私聊

液相色谱（LC）

  • 通过高效液相色谱邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生方法(Kaiser & Benner, 2005)测定海水中的氨基酸，如下图所示，峰非常低，有的低到积不出来，而且本来在26min以后该出的峰根本分不出来，不仅尝试了海水还尝试了湖水，依旧是峰很低，低到几乎没有，但同时测相同地方沉积物里的氨基酸就出峰正常，这到底是为什么。
    具体采用的方法为：荧光检测器检测，激发波长为330nm，发射波长为450nm。色谱柱为Echipse AAA分析柱(150 mm×4.6 mm, 5 μm)。分离过程中使用梯度洗脱，流动相A为甲醇和乙腈的混合溶液，体积比为67:33，流动相B为40 nmol/L磷酸二氢钾溶液，(pH=7.20)。
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    +关注 私聊

  • xiaolanzi5

    第1楼2022/08/16

    应助达人

    这个要做个加标试试，特别是在海水和湖水样品中加标，衍生后上机看看回收率如何？如果回收率可以接受，那就是本身海水和湖水的氨基酸含量低。如果回收率不满意，那有可能是柱前衍生方法不稳定的问题。

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  • dadgoh

    第2楼2022/08/17

    应助达人

    富集浓度不够吧。

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  • 安平

    第3楼2022/08/17

    应助达人

    标准品可以出峰，那么说明hplc系统是正常的。

    最好考虑衍生问题，是否衍生试剂不良。

    或者样品需要预处理。

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  • myoldid

    第4楼2022/08/18

    应助达人

    安捷伦的应用文集里是有个波长切换的，参考一下 应用文集吧

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