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方法开发色谱优化

液相色谱(LC)

  • 最近在开发一个中间体的色谱方法,有两个杂质的出峰不是很理想

    首先是邻苯二甲酸,不知道为什么会出两个峰,两个峰的光谱基本也没区别。然后萘甲酸出了一组峰,等吸收图的光谱也都一样,哪位老师能给指点下可能是什么问题,怎么解决,下面是我的方法

    A是纯水,B是乙腈,进样量20微升,柱温25℃,色谱柱安捷伦Infinity Lab Poroshell 120 EC-C18
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  • 歌名

    第1楼2022/08/17

    应助达人

    首先是邻苯二甲酸,不知道为什么会出两个峰,两个峰的光谱基本也没区别。--------------------------很可能是有个异构体的杂质,本身标品不纯引起的,有对位/间位的邻苯二甲酸的标品的话可以扎两针试试看。还有这两个峰出峰时间也太早了吧,1.5min前都出来了,基本没啥保留时间了,尝试改动下流动相,加缓冲盐试试看能不能盖上保留时间,总分析时长30min,相当于后面时间基本没啥用,奈甲酸一样,改善保留时间后在来看峰型即可

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  • xiaogumd11

    第2楼2022/08/17

    应助达人

    两个峰出峰比较靠前,有拖尾现象,可以先将流速调小点试试,一个方法就是不断一点点优出来的

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  • 安平

    第3楼2022/08/17

    应助达人

    楼主详细说明一下色谱柱和流动相的具体信息为好。。。

    目标峰保留太弱,需要考虑。


    可以考虑降低流动相的pH值,看看是否可以增加保留。

    或者考虑使用苯基色谱柱。

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  • xiaolanzi5

    第4楼2022/08/18

    应助达人

    水相加0.1%甲酸,抑制羧酸离子化,增加一下保留试试。

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  • myoldid

    第5楼2022/08/18

    应助达人

    两个目标物的保留时间都太短了,可以试试甲醇+水(0.1%甲酸)=30+70,280nm测定萘甲酸。

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