单通道膜片钳记录配置 标准的膜片钳配置在许多方面与胞外记录恰好颠倒过来了。由于对环境的控制非常少,实验通常在室温下、一个无灌注的培养皿中进行。 光学和机械需求则根据实际的细胞的大小(10或20 um)有特殊的规定。显微镜应该有放大300或400倍的能力,并需要某种对照增强能力(Nomarski, Phase or Hoffman)。Nomarski(微分干涉)对于电极的精确放置是最好的,因为它的影像依赖于视野一个很窄的深度上,这有助于精确定位(定位不好,影像是模糊的)。Phase(相差法)用于精确定位程度要求低一些的场合,但提供了更好的对比度。Hoffman方法提供了较便宜的,稍微退化点的Nomarski版本。
最好使用倒置显微镜(如奥林巴斯的倒置研究级显微镜IX71/IX81):
(1) 这样能使电极顶端更容易被看到,因为物镜在chamber的下方,
(2) 提供了更大更坚固的平台,用来固定微操纵器。
微操纵器应提供良好的,平滑的移动(最多每秒2um)。对震动和稳定性的需求决定于记录模式:是希望记录cell-attached- patch,还是cell-free (inside-out or outside-out) patch。 在cell-free- patch中,微操纵器只需要在形成封接过程中保持稳定,一旦离开了细胞,稳定就不是那么至关重要了。这通常不到一分钟。
单通道记录的放大器比胞外记录使用的要复杂得多。
组织切片膜片钳记录配置
膜片钳技术的近来扩展,切片膜片钳技术,其配置需要是体外胞外记录和常规膜片钳配置的一个组合。例如,该技术可能需要一个chamber,需要连续对切片进行灌流和供氧。大部分的其他要求,与常规膜片钳类似。光学需求与切片的厚度有关(thick-slice or thin-slice),对thick-slice,简单的解剖显微镜就够了(如奥林巴斯的解剖SZ和SZX系列显微镜);而对thin-slice,显微镜则需要提供400倍的放大,良好的顶端聚焦和对照增强。