【能力验证】微生物检测能力验证注意事项有哪些？

状元秀

2023/04/04

私聊

能力验证

实验室能力验证和室间比对活动是判定实验室检测能力的重要手段之一，不但可以提高实验室的检测能力和技术水平，发现实验室操作技术和质量管理上存在的问题，还能增加客户以及相关方对实验室的信任。

今天小编和大家一起来看看微生物能力验证注意事项有哪些：

01

能力验证样品接收及准备

1、操作前仔细阅读参指导书，关键是小的备注要注意，很多特殊情况的处理大都在备注里。

2、样品接收前的检查很重要，首先对样品的完整性进行检查，对信息的阅读要全面，如果发现样品有问题及时沟通，这样要比做样品的时候在发现来的要及时，能节省不少的时间；

3、作业指导书的阅读要到位，很多能力验证样品寄到后要跟一份作业指导书，作业指导书中往往会对本次能力验证的样品、成分、尺寸、选择方法、样品的结果记录、包括修约或样品的粘贴、样品寄发的注意事项等有明确的规定，熟读这些对试验准备有很好的作用。比如有的会要求将试验后样品一块寄发组织单位，有的实验室如果不仔细阅读的话很容易将测试后样品立即处理掉，如果寄样时在看见可就完了。

4、测试前的准备工作一定要做好，包括设备的校准、试运行等，有条件的情况下可以在正式测试前选择一块相仿的样品进行一下预测试，这样会将测试过程中的问题提前发现提前解决。对正式测试的操作有帮助。

02

能力验证样品预处理

1、培养基配制充分混匀后再灭菌

正确做法是用一部分水搅拌均匀后，再加入剩余水量，混匀后灭菌或分装。

2、混菌法倒皿要充分混匀

培养基倒完要左5圈右5圈（混匀速度一定要慢，目的是——避免培养基波动到二皿接触的缝隙部分造成后续污染），找较水平位置冷却凝固。

3、培养基要不要覆盖问题

覆盖的目的是为了阻止活菌在培养基表层通过鞭毛移动，造成片状生长，无法计数这一不利现象的发生。这里可以发挥主观能动性-对于不运动的菌，可以不覆盖，对于运动的菌覆盖。

总结一下

a.长期检测同一种样品，不覆盖并无蔓延现象，不覆盖；长期检测蔓延选择了覆盖，一直覆盖。

b.未知样品，进行覆盖和不覆盖的比对实验，然后决定以后同样的样品是否需要覆盖。养成经验。

c.能力验证实验，覆盖和不覆盖的都做，不要吝惜那么一点点培养基或耗材，毕竟能力验证实验做的漂亮才是实验室（是室而不是人！）能力的综合体现。

4、培养过程防止平皿干燥

培养过程中培养基可以倒的适当厚一些，比如25mL。培养箱底部接一个不锈钢盆，装上足量无菌水。

5、实验培养过程勤观察

微生物培养过程一般需要几小时到几十小时，要利用这段时间观察培养箱及菌生长情况，比如温度是否稳定，培养室内湿度如何等等，多思多看，准备预案。方有可能得到与盲样一致的实验结果。

原始记录应有条理、思路清晰,完整准确地记录菌株鉴定检验的全过程,原始记录要包含时间、试验现象、试验结果三个要素，方便试验出现问题的查找。

03

实验过程一定要做阴阳对照

阳性对照，是在试验中，检验培养基和培养条件是否适合，如果在实验中，阳性实验没有生长的话，那这个实验是失败的。阴性对照主要是检测培养基是否污染，在没有加入任何东西培养时，培养基培养后还是会显示阳性结果，这就说明培养基灭菌不彻底，染菌了，这样也会影响实验结果的。

04

培养基方面需要注意地方

1、培养基配制充分混匀后再灭菌

正确做法是用一部分水搅拌均匀后，再加入剩余水量，混匀后灭菌或分装。

一定要用震荡器充分混匀水化液，作为检测原液，普通手摇混匀与经震荡器混匀的样品液，计数结果相差较大。混匀后的样品严格按照指导书规定的时间进行检验。

2、混菌法倒皿要充分混匀

培养基倒完要左5圈右5圈（混匀速度一定要慢，目的是——避免培养基波动到二皿接触的缝隙部分造成后续污染），找较水平位置冷却凝固。

3、培养基要不要覆盖问题

覆盖的目的是为了阻止活菌在培养基表层通过鞭毛移动，造成片状生长，无法计数这一不利现象的发生。这里可以发挥主观能动性-对于不运动的菌，可以不覆盖，对于运动的菌覆盖。

总结一下

a.长期检测同一种样品，不覆盖并无蔓延现象，不覆盖；长期检测蔓延选择了覆盖，一直覆盖。

b.未知样品，进行覆盖和不覆盖的比对实验，然后决定以后同样的样品是否需要覆盖。养成经验。

c.能力验证实验，覆盖和不覆盖的都做，不要吝惜那么一点点培养基或耗材，毕竟能力验证实验做的漂亮才是实验室（是室而不是人！）能力的综合体现。

4、实验培养过程勤观察

微生物培养过程一般需要几小时到几十小时，要利用这段时间观察培养箱及菌生长情况，比如温度是否稳定，培养室内湿度如何等等，多思多看，准备预案。方有可能得到与盲样一致的实验结果。

原始记录应有条理、思路清晰,完整准确地记录菌株鉴定检验的全过程,原始记录要包含检测时间、检测现象、检测结果三个要素，方便检测出现问题的溯源。

05

结果判断

结果的判定一般根据设备操作，但是对于人为操作如评级、手工操作等结果可能会因为人员的差别而会有不同的偏差，这样在判定时最好是找有经验的部门负责人或质量专家一块定夺，这样的话会减少很多不必要的错误。

文章来源：网络

封面图片来源：创可贴会员，能力验证小编整理。

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