荧光表征外泌体捕获和释放
为了进一步阐明外泌体的捕获和释放过程,采用Tim4@ILI-01材料富集外泌体后,分别加入CD63和TSG101抗体进行孵育,经过3次洗涤后,加入FITC标记的山羊抗兔IgG进行避光孵育。通过免疫荧光实验对捕获的外泌体进行特异性识别。如图所示,Tim4@ILI-01材料经过后续的免疫反应未见荧光信号(图A,D)。捕获外泌体后的材料表面可观察到强的荧光信号(图B,E)。添加EDTA螯合剂后,外泌体与材料分离,洗脱液中存在荧光信号(图 C,F),表明捕获的外泌体已成功从Tim4@ILI-01免疫亲和材料中释放出来。
图外泌体捕获和释放过程的荧光图像:(A,D)Tim4@ILI-01免疫亲和材料(B,E)捕获外泌体后的Tim4@ILI-01免疫亲和材料(C,F)洗脱液中释放的外泌体。比例尺:1 μm