一种测量液相色谱仪梯度准确度的方法

Ins_f514f56e

2023/08/14

私聊

中药/天然药检测

梯度准确度是衡量一款液相色谱仪性能的重要指标，梯度如果不准确，将直接影响色谱峰的峰形、保留时间等，导致分析结果的精密度降低。一般我们认为仪器的梯度准确度在±0.5%以内对结果的影响是可以接受的。本人根据日常的工作经验，总结了一套液相色谱仪梯度准确度的测试方法。

测试条件：

流动相A-纯水，B-甲醇

色谱柱：粒径5 um，4.6*100 mm，反相C18柱

流速：0.5 mL/min

柱温：设定为室温附近

进样量：10 uL满定量环

检测器：UV

检测波长：272 nm

测试标准品：咖啡因（溶剂纯水）

测试方法：

将流动相比例设置为A/B=59.5/40.5，充分平衡色谱柱，UV检测器预热充分，重复进样10次，记录检测结果为Fai组。将流动相比例改为A/B=60.5/39.5，充分平衡色谱柱后，重复进样10次，记录检测结果为Fbi组。设置梯度比例为A/B=60/40，充分平衡色谱柱后，重复进样10次，每次进样结束后，将梯度比例更改为任意比例后再改回A/B=60/40，并充分平衡色谱柱后再进样，记录测试结果为Fi组。（Fai、Fbi、Fi表示各组测试结果中的第i次测试结果）

将Fai与Fbi组测试结果分别计算加权平均值，近似看作两次流动相比例下的保留时间真值。比较Fi组的测试数据，观察其保留时间是否落在两组的加权平均值的区间之间。

总结：

该方法只能测量梯度准确度的预估值，测量结果并不能代表仪器真实的梯度准确度，因为柱温稳定度、流量稳定性都会影响测试结果。

当我们在日常测试工作中发现结果的紧密度与重现性不符合要求时，可以用此方法来测试仪器的梯度准备度，以此衡量输液系统是否需要维护。