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双特异性抗体的功能与应用有哪些?
Ins_bf0c01c3
2023/08/23
私聊
生命科学仪器综合讨论
双特异性抗体是一种基因工程的产物,它有两种不同抗原的结合位点
,
可以结合两种不同的抗原。双特异性抗体可以通过结合靶细胞同时利用另一位点招募功能细胞,使得靶细胞与功能细胞相互作用,进而增强功能细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。
双特异性抗体主要包括含
Fc
段和不含
Fc
段两大类。含
Fc
区双特异性抗体保持了传统的单克隆抗体定制结构,具有两个
Fab
区和一个
FC
区。与传统单克隆抗体定制不同的是,这两个
Fab
可以结合不同抗原。不含
Fc
区双特异性抗体缺失了
Fc
区,由两个抗体的
VH
区和
VL
区组成或者由
Fab
片段组成。
如何制备双特异性抗体
制备双特异性抗体,科学界同仁已开发了诸多解决方案。杂交
-
杂交瘤法(也称为四源杂交瘤)是最早用于制备双特异性抗体的技术。基于两种不同杂交瘤细胞系的体细胞融合,表达所需特异性的鼠
IgG
。然而,这种方法制备的功能性双特异性抗体占比低,为后续的抗体纯化和质控带来了巨大的挑战。
通过使用分子克隆技术,双特异性
IgG
抗体由同一细胞系表达的两条不同重链和轻链组成。双特异性抗体的制备需要至少两个用于异二聚化重链的质粒和一个用于公共轻链的质粒。如果使用两个不同的轻链,则需要两个轻链质粒。一般建议
2
个单独的质粒上表达
HC
和
LC
,因为调整质粒比率是一种简单有效的方法。随后,通常要经历复杂的过程从异质稳定转染池中选择最理想的克隆细胞系,以用于大规模抗体生产。
与稳定转染相比,瞬时转染无需将重组
DNA
整合至宿主基因组中,可以在数天内快速得到结果。人胚肾细胞(
HEK293
)可用于双抗的瞬时表达,适合应用于双抗药物开发的早期阶段。
义翘神州提供:双特异性抗体生产服务
https://cn.sinobiological.com/services/bispecific-antibody-service
双特异性抗体功能与应用
①募集免疫细胞
细胞毒性
T
淋巴细胞(
CTL
)也称
T
细胞,属于
T
细胞的一种,可以特异性识别抗原肽
-MHCI
类分子复合物,与之发生结合,释放细胞因子裂解细胞或直接进行靶细胞杀伤,但由于很多肿瘤细胞会通多种机制逃避机体免疫系统(包括
CTL
)识别和攻击,从而形成免疫逃逸。
科学家们将
T
细胞上面加上了一个特殊的
CAR
结构,其中带有能够特异性识别靶细胞的相关抗体序列,相当于给
T
细胞装上了一个
GPS
,增强识别靶细胞能力和杀伤能力,使之成为一个超级卫士。
双特异性抗体
(BsAb)
如
CD19-CD3
也具有相似的作用,
BsAb
使
T
细胞激活并定向接近肿瘤细胞,这个过程伴随着
T
细胞和靶肿瘤细胞之间瞬时的溶细胞突触形成,随后
T
细胞增殖和激活导致肿瘤细胞裂解。除了
T
细胞,其他免疫细胞如巨噬细胞、单核细胞、粒细胞和自然杀伤细胞(
NK
)也会发挥杀死肿瘤细胞的效应。
②阻断信号通路
信号通路是指将细胞外的分子信号经细胞膜传入细胞内发挥效应的一系列酶促反应通路。这些细胞外的分子信号
(
称为配体
)
包括激素、生长因子、神经递质以及其它小分子化合物等。当配体特异性地结合到细胞膜或细胞内的受体后,在细胞内就会将信号传递下去,对细胞的生长、增殖、凋亡、血管生成、自吞噬等过程发挥着极其重要的生物学功能。某些肿瘤细胞异常高表达某种受体,从而导致肿瘤恶性增殖,利用双特异性抗体可以特异性的阻断两个或多个信号通路,减少其通过转换信号通路的方式形成的肿瘤细胞逃逸,提高治疗效果。
③阻断细胞因子
一些细胞因子被认为是引起炎症发生和自体免疫疾病的关键因子,因此阻断这些因子是有治疗潜力的。例如,抑制
IL17
或
TNF
α对于牛皮癣、银屑病关节炎、克罗恩病、溃疡性结肠炎、少年关节炎和许多其他疾病有很好的治疗效果。
BsAb
可以结合两个细胞因子受体,达到更好的治疗目的。
④作为运载工具
双特异性抗体具有蛋白识别的特异性。因此,通过一定的耦联技术将抗肿瘤药物或免疫调节药物等
“绑定”在一起,而另一抗原结合位点靶向肿瘤部位,进而提高药物在肿瘤部位的浓度,加强药物疗效。
更多双特异性抗体详情可以参看
https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody
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