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LCMS5500 连着的双峰是什么问题?

液质联用(LCMS)

  • 各位老师好,我最近想通过LC-MS5500,做到对细菌某种代谢物定量。以下是我的样品图,我的情况是这样的:该物质的模式是负离子模式,流动相是纯水和甲醇,下面的图是我跑的样品图,样品的前处理方式是:将细菌离心后的沉淀在-80冻1h后用50%甲醇涡旋3min,之后离心取上清过膜使用。我的标准品在跑标曲前的处理方法是用50%甲醇稀释过膜后使用,标准品跑出来的峰是右边的3min左右出来的一个峰,但是样品跑出来的是这样的两个峰,请问各位老师,这种是什么情况。
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  • 通标小菜鸟

    第1楼2023/08/29

    应助达人

    楼主有走空白吗?空白走出来有什么异常出峰不?如果空白正常,标准品一个峰,样品走出来两个峰,这种情况也正常啊,因为你也不知道样品基质是否纯,可能会存在其它物质在液质上也有响应的情况。建议多走几针样品,看看能否重现,如果都能重现,空白也正常,那应该就是样品里的其它物质

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  • 歌名

    第2楼2023/08/29

    应助达人

    1.换个柱子试试,零点几分钟的是共流出,,流动相和柱子都试着换换试试看,
    2.样品用初始流动相处理,峰前倾比较明显

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  • hujiangtao

    第3楼2023/08/29

    应助达人

    前面的应该是基质引入的,用MRM模式只采集目标物保留时间前后范围的时间段峰型能更好些,干扰也更少

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  • Andy-pai

    第4楼2023/08/29

    老师你好,我的空白是正常的,只有样品是这样子的,那可能是我的样品前处理方法有问题,我再想想怎么调整,谢谢老师~

    通标小菜鸟(v3141805) 发表:楼主有走空白吗?空白走出来有什么异常出峰不?如果空白正常,标准品一个峰,样品走出来两个峰,这种情况也正常啊,因为你也不知道样品基质是否纯,可能会存在其它物质在液质上也有响应的情况。建议多走几针样品,看看能否重现,如果都能重现,空白也正常,那应该就是样品里的其它物质

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  • Andy-pai

    第5楼2023/08/29

    谢谢老师,我下次分别换一下柱子和流动相使使,但是我的流动相之前使用乙腈和纯水或乙腈和甲酸水或甲酸水和甲醇都不太行,请问老师有适合负离子模式推荐的流动相吗;另外老师提到初始流动相处理,我的样品一直在用50%有机相去处理,请问老师这个算是初始流动相处理吗。

    歌名(Ins_eedcdc41) 发表:1.换个柱子试试,零点几分钟的是共流出,,流动相和柱子都试着换换试试看,
    2.样品用初始流动相处理,峰前倾比较明显

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  • Andy-pai

    第6楼2023/08/29

    好的,谢谢老师,我试一下这个方法。

    hujiangtao(hujiangtao) 发表:前面的应该是基质引入的,用MRM模式只采集目标物保留时间前后范围的时间段峰型能更好些,干扰也更少

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  • Insm_630e697a

    第7楼2023/08/29

    你的dwell time是多少啊,感觉峰型有点毛刺,另外可以尝试添加甲酸铵,或者乙酸铵(LC以上的级别)等易挥发性盐,尝试一下,然后你是不是有两个通道,是同位素内标吗,如果不是,考虑是不是溶剂效应,你的标准品的基体和样品一致吗,如果不是,就要考虑基体带来的干扰

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  • Andy-pai

    第8楼2023/08/29

    老师你好,我的dwell time 是100,我下次把这个调高一点试试看,另外我的没有内标,我的标准品和样品溶剂是一样的,可能是样品基质中存在一些干扰物质。老师您对这种基质干扰现象有什么好的建议吗。

    Insm_630e697a(Insm_630e697a) 发表:你的dwell time是多少啊,感觉峰型有点毛刺,另外可以尝试添加甲酸铵,或者乙酸铵(LC以上的级别)等易挥发性盐,尝试一下,然后你是不是有两个通道,是同位素内标吗,如果不是,考虑是不是溶剂效应,你的标准品的基体和样品一致吗,如果不是,就要考虑基体带来的干扰

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  • Insm_630e697a

    第9楼2023/08/30

    我做的是血浆,如果上诉图响应比你的LLOQ高,可以考虑用相同的溶剂稀你的样品,另外可以减少有机项的占比,整个液相梯度拉长一点试试

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  • Andy-pai

    第10楼2023/08/30

    好的,老师你说的减少有机相的占比,是指我本来用50%的有机相溶剂去稀释的话,可以考虑20%之类的有机相溶剂去稀释的意思吗;还是指我在设置洗脱梯度的时候注意一下

    Insm_630e697a(Insm_630e697a) 发表:我做的是血浆,如果上诉图响应比你的LLOQ高,可以考虑用相同的溶剂稀你的样品,另外可以减少有机项的占比,整个液相梯度拉长一点试试

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