仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯
立即体验
APP内打开
回版面
评论
收藏
点赞
拍砖
举报
取消
发布
当前位置:
仪器社区
>
生命科学仪器
>
生命科学仪器综合讨论
>
帖子详情
ELISA类型及其原理:常见问题解答
Ins_bf0c01c3
2023/12/08
私聊
生命科学仪器综合讨论
酶联免疫吸附测定(
ELISA
)又称酶免疫测定(
EIA
),是一种广泛应用于免疫学检测领域的生化技术。该技术的主要原理是利用抗体或抗原与酶的结合,将免疫反应转化为可定量测定的信号。在
ELISA
实验中,通常将含有未知量的抗原固定在固相载体上,如微孔板。然后,加入特异性抗体与抗原孵育,使抗体与抗原结合。最后,加入酶标记的二抗,与特异性抗体结合。通过酶促反应,将无色的底物转化为有色的产物,从而实现对抗原的检测。根据实验设计及目的不同,
ELISA
可分为间接
ELISA
、直接
ELISA
、夹心
ELISA
和竞争
ELISA
等不同类型。下面将分别介绍它们的原理及常见问题:
间接
ELISA
原理:
间接
ELISA
的原理是基于抗原和抗体的特异性结合。在间接
ELISA
中,首先将待测物质(通常为抗原)固定在固相载体(如微孔板)上,形成抗原固定化的固相。然后,加入一定浓度的非特异性抗体,使其与固相上的抗原结合。接下来,加入特异性抗体,它与非特异性抗体结合在一起,形成抗原
-
非特异性抗体
-
特异性抗体复合物。最后,通过酶标记的二抗或酶标记的蛋白
A/G
结合到特异性抗体上,通过酶促反应产生荧光、发光或颜色变化等信号,从而检测抗原的存在和浓度。
直接
ELISA
原理:
直接
ELISA
的原理是将酶标记的抗体或抗原直接与待测物结合,形成夹心复合物,然后加入底物检测酶的活性。
具体来说,直接
ELISA
方法是将酶标记的抗体或抗原直接固定在固相载体(如微孔板)上,然后加入待测样本,使其与固定化的抗体或抗原结合。随后加入底物,通过酶促反应产生荧光、发光或颜色变化等信号,从而检测待测物的存在和浓度。
直接
ELISA
方法的优点是操作简单,但灵敏度较低,适用于检测浓度较高的待测物。同时,该方法也受到固相载体、抗体或抗原的性质和质量的影响,因此需要选择合适的试剂和实验条件。
夹心
ELISA
原理:
夹心
ELISA
的原理是将特异性抗体包被于固相载体上,加入待测抗原,使其与固相上的抗体结合,形成固相抗原
-
抗体复合物。然后加入酶标记的二抗,使其与固相抗原
-
抗体复合物中的抗体特异性结合,形成固相抗原
-
抗体
-
酶标抗体复合物。最后加入底物显色,通过观察颜色变化和显色深浅,判断待测抗原的存在与否和浓度高低。
夹心
ELISA
方法的优点是灵敏度高、特异性好、操作简便、易于自动化等。由于使用了固相载体,可以将待测抗原和游离的未结合的抗原分离,从而提高了检测的准确性和可靠性。此外,夹心
ELISA
还可以用于检测小分子和大分子抗原,应用范围广泛。
竞争
ELISA
原理:
竞争
ELISA
的原理是利用酶标记技术,通过酶与酶底物反应的颜色变化来检测样品中特定物质的含量。竞争
ELISA
的基本步骤包括涂膜、孵育、洗涤、加底物和反应终止。在
ELISA
板的孔中涂覆含有特定抗原的抗体,使其与孔壁结合。然后,加入待测样品和酶标记抗体,使其与孔中的抗原结合。在孵育过程中,待测样品中的目标物质与酶标记抗体竞争与抗原结合,形成抗原
-
酶标记抗体
-
目标物质复合物。经过洗涤步骤,将不与抗原结合的物质洗去,以减少干扰。接下来,加入底物,酶与底物反应产生颜色变化。最后,通过加入反应终止剂停止酶反应,将颜色的强度与目标物质的含量相关联。
ELISA
常见问题解析:
ELISA
的优势是什么?
与其他免疫分析方法相比,
ELISA
有很多优点:
ELISA
检测更为准确,且具有高灵敏度和特异性;与其他用于体内检测物质的方法(如放射免疫测定,
RIA
)相比,具有更明显的优势。此外,
ELISA
还具有如无需放射性同位素(放射性物质)或昂贵的辐射计数器(辐射计数装置)等其他优势。
如何保存义翘神州的
ELISA
抗体?
分析说明书上列出了具体的保存建议。我们建议将所有抗体进行分装后保存在
-20
°
C
或以下,避免多次冻融,以免影响抗体活性。如果抗体未按说明书规定存储,我们将无法确保其性能。
义翘神州
ELISA
抗体的保质期是多久?
除非说明书中另有说明,我们的大多数抗体产品可以在
2
℃
-8
℃下保存
1
个月,而不影响检测活性;在
-20
℃
-70
℃条件下保存时,从签收日期算起,抗体可以稳定存放
12
个月(注:应避免反复冻融)。
义翘神州的
ELISA
抗体是如何供应的?
义翘神州的所有
ELISA
抗体均以液体形式提供。在环境温度下,产品在运输过程中保持稳定。我们在
-20
°
C
、室温以及
37
°
C
温度条件下,对每种抗体的稳定性和活性进行了测试,持续时间超过
7
天。在这三种条件下,抗体都具有同样的活性和稳定性。
义翘神州提供
酶联免疫吸附测定
(ELISA)
检测服务
,详情可以关注
https://cn.sinobiological.com/services/elisa-service
相关话题
1
肺癌概述及早期诊断
2
什么是蛋白标签?蛋白标签在重组蛋白生产中有什么作用?
3
什么是抗体标记?高质量的标记抗体有哪些?
4
国内做重组蛋白好的公司推荐:义翘神州
5
低温设备中液氮管道真空漏气
近期热榜
【官方邀请】高效液相色谱使用情况有奖调研
反向液相色谱柱使用过程中的常见问题及排查经验分享
学习|测量不确定度干货知识讲解
丹纳赫四十周年寄语征集领大礼包
热门活动
【售后专场--招聘会】
第三届微课大赛投票进行中ing
猜你喜欢
最新推荐
热门推荐
更多推荐
【原创】发布DNASIS MAX Trial 2.7的破解补丁
2006/10/19
【通告】本版即将对月发帖前五实施奖励
2008/09/19
实验室防护问题大家来讨论讨论哈^_^
讨论
2011/09/19
优利特URIT-12型便携式血红蛋白分析仪电路原理解析
第十六届原创
2023/08/01
【求助】ELISA 试剂盒加标回收率测定
2010/09/15
可高压护目镜
原创
2012/04/22
哪位大侠有SN/T 1204-2016标准,报批稿也行
求助
2017/03/31
冻干机的基本原理及实践
分享
2012/10/03
医疗仪器的革新:守护生命的科技力量
分享
2024/09/19
仪器的魅力:科技探索与精准控制的基石
分享
2024/09/19
Tigergene动物实验用颅钻
原创
2024/09/16
全光谱流式细胞仪原理,可以帮忙解答一下吗
原创
2024/09/09
bd流式细胞仪多少钱一台,可以帮忙解答一下吗
原创
2024/09/09
生物技术领域外商投资放开-干细胞重大利好!
原创
2024/09/09
化学发光免疫分析原理,能不能展开详细说说
原创
2024/09/07
Excounter第三代全自动外泌体分析仪重磅上市(让外泌体检测从此简单)
原创
2024/09/07
能力验证结果的整改
第十七届原创
2024/09/18
内审员在实验室中的作用
第十七届原创
2024/09/18
人比人真的该死!”-同是去参观实验室的两个人给带来的收获却是不同的!!
第十七届原创
2024/09/18
有经验的新进人员为什么就不能“拿来即用”哪?
第十七届原创
2024/09/18
刚买的设备采用了几天怎么就坏了?
第十七届原创
2024/09/18
实验室评审结果的遐思
第十七届原创
2024/09/18
检测报告出问题真正的法律责任应该由谁来负?
第十七届原创
2024/09/18
植物油中其他油的色谱检测初探
第十七届原创
2024/09/18
流式细胞分析方案详解:从步骤到流式免疫检测的全面指南
资料
2023/12/08
替代浮球开关卡死失效的解决方案
原创
2023/12/08
耶拿pcr仪维修(全国服务)Biometra pcr仪售后维修
原创
2023/12/08
饮水机非接触式液位传感器
原创
2023/12/08
59款咖啡全部检查出致癌物!涉及多个知名品牌!
讨论
2023/12/08
氟化物的计算,power函数如何在excel编辑?
已应助
2023/12/08
对检测结果应如何判定?
已应助
2023/12/08
海能未来技术集团股份有限公司诚聘机械工程师-济南市,坐标济南市,你准备好了吗?
原创
2023/12/08
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器(上海)有限公司(PerkinElmer)
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁
举报帖子
执行举报
点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...