仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯
立即体验
APP内打开
回版面
评论
1
1
拍砖
举报
取消
发布
当前位置:
仪器社区
>
生命科学仪器
>
生命科学仪器综合讨论
>
帖子详情
Trx标签蛋白:深度解析与常见问题解答
Ins_bf0c01c3
2024/01/19
私聊
生命科学仪器综合讨论
硫氧还蛋白(
Thioredoxins
)是一系列广泛存在于生物体内的氧化还原酶,它能通过置换硫代二硫化物来减少二硫键的结合。常用作融合表达标签的硫氧还蛋白
A(TrxA),
分量为
11.6kDa
,来源于大肠杆菌。
TrxA
标签最独特的优点是它的热稳定性。
TrxA
本身不作为亲和标签来进行重组蛋白优化,而是通过在高温条件下将杂蛋白变性去除而重组蛋白得以保存。
TrxA
也具有极好的促溶效率,用作促溶标签时可将重组蛋白的可溶性表达从
12%
提高至
95%
。
下面是针对
trx
标签常见问答解析:
①
trx
标签蛋白序列
MSDKIIHLTD DSFDTDVLKA DGAILVDFWA EWCGPCKMIA PILDEIADEY QGKLTVAKLN IDQNPGTAPK YGIRGIPTLL LFKNGEVAAT KVGALSKGQL KEFLDANLAG SGSGHMHHHH HHSSGLVPRG
②带有
trx
标签会不会影响蛋白的抗原性
有可能的,
trx
标签是比较大的融合标签,有
20
多
KDa
,非常有可能改变蛋白的抗原决定簇。
一般为了不影响蛋白的功能,会在
trx
标签和目标蛋白之间加一个酶切位点,比如肠激酶的位点
DDDDK
,把
trx
标签去除掉。
③
TRX
标签蛋白怎么纯化
一般这个载体中都会有
His
标签,直接用镍柱纯化即可
④常见的
蛋白标签
有哪些?有什么特点?
常见的蛋白标签有
His-Tag
、
FLAG-Tag
、
HA-Tag
、
Myc-Tag
、
SUMO-Tag
……
His-Tag
主要应用:蛋白纯化优选,也可用于检测。
特点:
? 分子量小,不影响目的蛋白的可溶性、结构和功能。
? 可在非离子型表面活性剂存在
/
变性条件下纯化,前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用,后者在纯化包涵体蛋白时表现突出。
? 可应用于多种表达系统,纯化的条件温和。
? 可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签。
? 免疫原性相对较低。
FLAG-Tag
主要应用:
广泛的应用于蛋白表达、纯化、鉴定、功能研究及其蛋白相互作用等相关领域,在真核表达系统中表达效率更高。
特点:
? 分子量小,不影响融合蛋白功能,比同类标签更具亲水性。
? 目的蛋白可直接通过
FLAG
标签进行亲和层析,此层析为非变性纯化,可以纯化有活性的融合蛋白且纯化效率高。
? 可以被抗
FLAG
抗体所识别,便于通过
WB
、
ELISA
等方法对含有
FLAG
标签的融合蛋白进行检测、鉴定。
? 融合在目的蛋白
N
端的
FLAG
标签,其可以被肠激酶切除(
DDDK
),从而得到特异的目的蛋白。
更多关于蛋白标签详情可以参看:
https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag
义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索
“义翘神州”与我们取得联系。
相关话题
1
肺癌概述及早期诊断
2
膜蛋白提取原理及方法
3
简述抗体的主要功能及作用
4
多克隆抗体的制备优缺点及应用
5
液氮罐出现生锈现象的原因及解决方法
近期热榜
【官方邀请】高效液相色谱使用情况有奖调研
反向液相色谱柱使用过程中的常见问题及排查经验分享
学习|测量不确定度干货知识讲解
丹纳赫四十周年寄语征集领大礼包
热门活动
【售后专场--招聘会】
第三届微课大赛投票进行中ing
猜你喜欢
最新推荐
热门推荐
更多推荐
【分享】移液器的选型-专业移液器文章
2010/03/20
微生物生长的几种检测方法
分享
2012/10/17
以平板划线为例与无菌操作有关的环节
分享
2012/05/03
走出基因论的误区
分享
2011/07/22
用凝胶过滤层析进行蛋白纯化的流程及优势
资料
2023/10/30
FLAG标签序列的设计与应用详解
资料
2023/10/10
单抗、多抗制备动物免疫
分享
2013/11/28
生物分子类实验室常用实验技术原理汇总(图片为连接形式)
分享
2013/10/17
医疗仪器的革新:守护生命的科技力量
分享
2024/09/19
仪器的魅力:科技探索与精准控制的基石
分享
2024/09/19
Tigergene动物实验用颅钻
原创
2024/09/16
全光谱流式细胞仪原理,可以帮忙解答一下吗
原创
2024/09/09
bd流式细胞仪多少钱一台,可以帮忙解答一下吗
原创
2024/09/09
生物技术领域外商投资放开-干细胞重大利好!
原创
2024/09/09
化学发光免疫分析原理,能不能展开详细说说
原创
2024/09/07
Excounter第三代全自动外泌体分析仪重磅上市(让外泌体检测从此简单)
原创
2024/09/07
能力验证结果的整改
第十七届原创
2024/09/18
内审员在实验室中的作用
第十七届原创
2024/09/18
人比人真的该死!”-同是去参观实验室的两个人给带来的收获却是不同的!!
第十七届原创
2024/09/18
有经验的新进人员为什么就不能“拿来即用”哪?
第十七届原创
2024/09/18
刚买的设备采用了几天怎么就坏了?
第十七届原创
2024/09/18
实验室评审结果的遐思
第十七届原创
2024/09/18
检测报告出问题真正的法律责任应该由谁来负?
第十七届原创
2024/09/18
植物油中其他油的色谱检测初探
第十七届原创
2024/09/18
【科研仪器案例库收录文章展示】:结合机器学习的光谱技术在塑料鉴别中的应用研究进展
原创
2024/01/19
MAP-220C多应用平台JDSU
仪器微课堂
2024/01/19
快速烘干玻璃器皿-容量瓶
分享
2024/01/19
Rogers RO4000? 系列层压板
分享
2024/01/19
加湿器如何实现多段液位检测
原创
2024/01/19
上海市环境保护产业协会关于征求《降尘自动监测技术规范》团体标准意见的通知
分享
2024/01/19
火电厂烟气脱硝技术导则
原创
2024/01/19
举报资料“GB/T 2608-2012 硅砖”
2024/01/19
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器(上海)有限公司(PerkinElmer)
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁
举报帖子
执行举报
点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...