仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯
立即体验
APP内打开
回版面
评论
收藏
点赞
拍砖
举报
取消
发布
当前位置:
仪器社区
>
生命科学仪器
>
生命科学仪器综合讨论
>
帖子详情
杆状病毒昆虫细胞表达系统:原理探微与常见问题解决指南
Ins_bf0c01c3
2024/02/22
私聊
生命科学仪器综合讨论
在生物技术的广阔天地中,杆状病毒昆虫细胞表达系统以其独特的魅力和广泛的应用前景,正逐渐受到研究者们的青睐。这一系统巧妙地利用经过改造的杆状病毒基因组,在大肠杆菌中高效复制,并通过精密的转座过程将目的基因精准地插入到
bacmid
的特定位点。这一过程不仅展示了生物技术的精巧与奇妙,更为科研工作者提供了强大的工具,用以探索和研究蛋白质的功能与结构。然而,任何技术在实际应用中总会遇到一些问题和挑战。为了帮助大家更好地掌握和运用这一系统,本文将深入探讨其原理,并分享在实际操作中可能遇到的常见问题及其解决方案,以期为大家的科研工作提供有益的参考和指导。
杆状病毒昆虫细胞表达系统原理:
经过精心改造的病毒基因组(即杆状病毒穿梭载体
Bacmid
)在此系统中展现了非凡的复制能力。它们能在大肠杆菌如
DH10Bac
菌株中自如地繁衍。这一复制过程得益于供体质粒中目的基因两侧所锚定的
Tn7
转座原件。这些原件与
DH10Bac
菌株中的
helper
质粒所编码的转座酶活性相互作用,将目的基因精准地转座到
bacmid
的特定位点上。当目的基因成功插入后,会导致
bacmid
上的
LacZ
基因发生移码,进而通过蓝白斑筛选法轻松鉴定出阳性重组
bacmid
。经过提取后,这些
bacmid
便能转染昆虫细胞,开启其在昆虫细胞中的高效表达之旅。
昆虫
-
杆状病毒表达平台的常见问题解答
1
、
义翘神州是否接受已构建的表达载体进行
蛋白表达
?
对于众多常规蛋白表达项目,义翘神州确实欢迎并接受客户直接提供的表达载体,如
pFastBac
等,进行专业的蛋白表达。我们深知每个蛋白的特性独一无二,因此,我们始终致力于与客户保持紧密的沟通,共同探讨并确定最佳的纯化方案,确保最终交付的产品符合客户的期望和需求。我们承诺,通过我们的专业知识和丰富经验,将客户的表达载体转化为高质量的蛋白产品。
2
、
义翘神州是否接受包被好的杆状病毒直接进行蛋白表达?
对于一些常规蛋白表达项目我们同样也可以直接使用客户制备好的杆状病毒进行蛋白表达,我们也会根据蛋白的实际特性与客户沟通交流纯化方案和最终交付形式。
3
、
哪些类型的蛋白适合杆状病毒
-
昆虫细胞表达系统进行制备?
杆状病毒
-
昆虫细胞表达系统适用于多种类型的蛋白表达,鉴于昆虫细胞可实现高密度培养的特性以及相对原核系统较为完备的后修饰和蛋白折叠机制,杆状病毒
-
昆虫细胞表达系统通常被较多的用于胞内定位蛋白的表达,并且其在表达一些稳定性相对较差的蛋白,比如转录因子等方面也有一定的优势。
4
、
杆状病毒表达系统有哪些优势?
杆状病毒表达系统是属于真核表达系统,在蛋白质表达方面具有许多优势,比如可容纳大量
DNA
插入片段、相对较高的表达水平以及类似于哺乳动物细胞的真核蛋白质修饰等。 杆状病毒表达系统是结构分析中最常用的表达系统。
5
、
在表达后的修饰中,昆虫系统出现多条带,不同的修饰在活性上有区别吗?
重组表达的后修饰会出现不均一的情况,但不是所有的后修饰都会对蛋白活性有影响,所以需要结合该蛋白的修饰位点在功能上的作用进行分析,不同的修饰不一定在活性上有差异。
6
、
目的蛋白表达后会和病毒一起释放到胞外吗?
需要确定目的蛋白是分泌表达还是胞内表达。分泌表达的蛋白会释放到胞外,因此纯化的时候选用培养上清。
义翘神州为客户提供
杆状病毒
-
昆虫表达平台
,在
杆状病毒
-
昆虫细胞蛋白表达服务
方面具有丰富的经验,特别是针对序列较长的蛋白、病毒类蛋白、激酶、胞内蛋白以及膜蛋白等。义翘神州拥有多种常用昆虫细胞系(
Sf9, Sf21, High-Five
),一般来说,
Sf9
更利于病毒扩增,
Hi5
更利于蛋白表达。义翘采用的是
Sf9
扩增病毒,
Hi5
重组表达,并且凭借优化的表达载体和更高滴度的病毒包装技术,有效提高蛋白表达量,交付高活性蛋白。
详情可查看:
https://cn.sinobiological.com/services/platform/baculovirus-insect-protein-expression
义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索
“义翘神州”与我们取得联系。
相关话题
1
细胞因子及其受体的分类有哪些?
2
多色荧光免疫组化(mIHC)技术的核心分类与特色
3
揭秘抗组蛋白抗体:健康守护者还是疾病信号?
4
抗体与蛋白的区别?抗体蛋白结构解析
5
蛋白纯化常见问题解析
近期热榜
赛默飞实验室产品焕新计划有奖调研!
【七月征文】不一YOUNG实验“猿”
报名开启:ICS2024第十三届光谱网络会议!
推荐收藏!盘点中药材及饮片检测解决方案
热门活动
甄选国优仪器,助推设备更新
采购咨询618活动:1000元奖励等你拿
猜你喜欢
最新推荐
热门推荐
更多推荐
引用 在发酵工艺角度看蛋白表达
分享
2011/08/01
生物传感器技术发展现状和未来展望
分享
2012/05/02
求推荐 500ml样品瓶 垂直混匀仪
求助
2013/10/30
心血管检测仪
原创
2023/11/26
【讨论】ELISA交流,Bio-rad (伯乐)的酶标仪交流
2010/02/08
我科学家构建漏声表面波生物传感器检测系统
分享
2012/04/27
看看这个仪器长得像什么??哈哈 超可爱哒
讨论
2012/02/10
【资料】化学中的纳米材料(英文版)-Kenneth J. Klabunde
2006/07/16
【我们不一YOUNG】蛋白质浓度测定方法大全
原创
2024/07/06
【我们不一YOUNG】HTS酶抑制剂筛选的流程介绍
分享
2024/07/05
太空微重力环境下癌症药物研究系统进口航空航天随机定位微重力模拟仪AJ001X
分享
2024/07/05
弱光成像或体内发光实验Atik TE科研制冷CCD相机
原创
2024/07/05
【我们不一YOUNG】结缘仪器,一起结缘,与仪器信息网一起成长
原创
2024/07/01
心血管检测仪打开后出现ch375dll.dll电脑丢失怎么办
已应助
2024/07/01
出售贝克曼DXC800生化分析系统
原创
2024/06/21
编织袋拉力机
原创
2024/06/14
检测报告一定要有判定结果吗?
求助
2024/07/01
气相FID重现性不好原因
求助
2024/07/01
求助安捷伦GC7890B,EPC无响应解决办法
求助
2024/07/01
‘有奖问答’对错题’:用抽样方案(30,0)对产品批进行连续验收,当批不合格品率为1%时,方案的接收概率为73.97%,则平均检出质量为( )。
讨论
2024/07/05
HJ1332便携非甲实际应用问题
讨论
2024/07/01
如何做好体系工作?
分享
2024/07/01
多人主检的报告,检测审核应该怎么签字
求助
2024/07/05
EI源的灯丝镉厂家通用吗?
求助
2024/07/03
倾倒开关如何实现风扇跌倒保护功能的?
原创
2024/02/22
电熨斗如何防止干烧-光电分离液位传感器
原创
2024/02/22
10.2mg/mL的水中甲醛溶液标准物质如何配制成10ug/mL甲醛标准溶液?
已应助
2024/02/22
求助--油墨成分测定的讨论
已应助
2024/02/22
热电TSQ液质真空度没有读数
已应助
2024/02/22
60万!泰安市食品药品检验检测研究院(泰安市纤维检验所)实验室试剂耗材采购项目
求购
2024/02/22
GSB16-2159标准色就是潘通色卡国际标准通用彩通色卡吗?
讨论
2024/02/22
怎么写招投标
已应助
2024/02/22
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器(上海)有限公司(PerkinElmer)
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁
举报帖子
执行举报
点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...