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液相色谱仪操作注意事项

通标小菜鸟

2024/10/15

前处理综合讨论

液相色谱仪基本操作流程：

一、开机

1.打开送液泵电源，打开排液阀（反时针旋转180度），按purge键进行排气泡的操作，确认输液管路中无气泡时停止该操作，将排液阀旋回到原位置。

2.设定流速，平衡柱子30分钟[Fun]+“流速”+[enter]

3.打开测器电源，设定波长[Fun]+“波长”+[enter]+[CE]

4.打开工作站（积分仪），设定相关参数

二、进样及数据采集

三、数据处理及打印报告

四、关机：

1.数据采集完毕即可关闭检测器;

2.泵更换甲醇冲洗流路30分钟(如使用缓冲盐流动相请先用水冲洗流路10分钟);

3.关泵

液相色谱仪基本操作注意事项：

1.流动相必须用HPLC（色谱）级的试剂，使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用045u或更细的膜过滤)。

2.流动相过滤后要用超声波脱气，脱气后应该恢复到室温后使用。

3.不能用纯乙腈作为流动相，这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。

4.使用缓冲溶液时，做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子(一小时)，然后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上，以充分洗去离子。对于柱塞杆外部，做完样品后也必须用去离子水冲洗20以上。

5.长时间不用仪器，应该将柱子取下用堵头封好保存，注意不能用纯水保存柱子，而应该用有机相(如甲醇等)，因为纯水易长霉。

6.每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。

7.C18柱不能进蛋白样品，血样、生物样品。

8.堵塞导致压力太大，按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀查并清洗。

清洗方法；①以异丙醇作溶剂冲洗：②放在异丙醇中间用超声波清洗；用10％稀硝酸清洗。

9.气泡会致使压力不稳，重现性差，所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。

10.如果进液管内不进液体时，要使用注射器吸液：通常在输液前要进行流动相的清洗。

11.要注意柱子的PH值范围，不得注射强酸强碱的样品，特别是碱性样品。

12.更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边清洗，然后插入新的流动相中。更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡。

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