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高效液相色谱柱怎么样选择

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2024/10/22

综合仪器讨论

高效液相色谱柱选择之一看物理性质。例如看柱长，内径，粒径，孔径，颗粒形状等参数有没有符合自己要求。

高效液相色谱柱选择之二看化学性质。硅胶基质：最通用的基质，强度大，化学修饰容易，但使用的pH值范围有限(一般为2—8，特殊修饰的可以达到1—12)。

聚合物基质：多为聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂，化学稳定，应用pH范围宽，具有更强的疏水性，对蛋白质等样品分离效果较好；但强度较小，有机溶剂可能导致聚合物溶胀而受损，批次重复性较差，商品化色谱柱不多，一般价格较贵。载碳量：基质表面键合相的比例，载碳量高，则保留增加，适合分析非极性化合物。

键合相：键合试剂不同，对化合物的选择性不同，一般长链的烷基键合相(C18 、C8)比短链的(C4、 C3)稳定；非极性的键合相比极性的键合相(-NH2)稳定。封端：用短链将裸露的硅羟基键合后封闭起来，以减少残留的硅醇基，减轻待测组分与酸性硅羟基反应而引起的色谱峰拖尾现象。尤其对于极性样品而言，未封端处理的色谱柱分离效果较差。

高效液相色谱柱选择之三根据柱长及内径选择。长度的选择：柱越长，总柱效越高(n值越大)，柱越长，分析时间也越长。实验室一半以上的工作采用250—300mm，这也是普遍柱长。

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