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流式细胞仪怎么分析

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2024/10/26

综合仪器讨论

?流式细胞仪数据分析?主要包括数据可视化、门控、补偿和数据分析软件的使用。

数据可视化

流式细胞术的数据分析软件通常使用含有一系列数据图的工作表来实现数据可视化。单参数（直方图）或双参数（散点图）显示了每种标志物的表达模式。通过设门来明确数据边界并分离具有共同表型特征的细胞，从而识别和分离感兴趣的细胞群体?。

门控

门控是流式细胞术分析中的关键步骤。通过层层设门或布尔逻辑可以缩小目标群体的范围。根据门内的数据点（如频率）进行统计计算。例如，辅助T细胞群先根据CD3+、CD4+的表达被选定，之后再根据活化标记物（如CD25）的表达选定活化细胞群所在区域，进行活化分析?。

补偿

在设置流式细胞仪的电压时，必须确保所有阳性信号都在标度范围内（在仪器可检测到的荧光限度内）。如果信号饱和，则降低在捕获微球上使用的抗体效价。对于每个补偿对照，每个通道的电压必须相同。补偿值可在采集前利用仪器软件自带的算法来计算，也可在数据采集后利用流式细胞术分析软件来计算?。

数据分析软件

常用的流式分析软件包括FlowJo、WinList、FCS Express、Kaluza和WinMDI。这些软件不仅用于常规的流式细胞术分析，还支持高维数据分析。高维数据分析工具包括SPADE、tSNE、PCA和FLOCK等，这些工具可以帮助分析含有14个以上参数的高维数据?。

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