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【求助】选择哪种固相萃取柱?

前处理综合讨论

  • 我昨天拿C18,碱性氧化铝柱,以及磺胺专用柱都做了一下尝试,发现前两个柱子直接上药样时的回收率均在85%以上,碱性氧化铝柱液体通过时速度还可以,唯一的缺点就是洗脱液(75%乙腈)很难蒸干,我是用减压旋转蒸干的,蒸了10分钟左右还是有大约200ul的液体蒸不干.这样我用2ml流动相来定容就困难了.我也查阅了相关的资料,有的人就直接拿5ml75%乙腈洗脱液加一定摩尔的磷酸定容至10ml,然后过滤进样,这样我感觉其进样的成分和流动相有一定的悬殊,基线能跑平吗?针对以上的疑问,请高手指点!谢谢
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  • 家有宝贝儿

    第1楼2007/07/09

    这个主要还是要看你的流动相是什么,只要样品溶液强度低于流动相影响就不大,当然能完全一致最好。其实你用减压旋转蒸发是不可能完全蒸干的,因为你的洗脱液是75%乙腈,还有25%的水存在,经过减压旋转蒸发后乙腈的含量已经很低了,对后续的操作应该不会有太大的影响。
    我以前用C18的小柱处理过一些蛋白,然后也是减压旋转蒸,浓缩了蛋白,后来直接上CZE,对结果没有什么影响。

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  • amandaday

    第2楼2007/07/10

    影响不是很大,曾经我用过KD蒸发仪,很难蒸干,直接定容1ML,对后续实验基本没有影响。
    此外,进样的成分与流动相有差别,影响不大,如可能的话,与流动相保持一致,如有差别,也不会造成太大影响,基线可以走平。

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  • 第3楼2007/07/11

    你可以用N2气吹来浓缩效果应该会更好。

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  • suomula

    第4楼2007/07/13

    使用氮吹仪吹干,效果会更好些。进口的氮吹仪可以选择 美国Organomation氮吹仪,国产的氮吹仪简单实用,更经济些,天津恒奥,杭州奥盛以及北京同泰的都不错

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  • yddlx

    第5楼2007/07/14

    我用美国Organomation氮吹仪的,效果不错

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