【求助】急求： 用荧光探针Fura-2/AM 测细胞内钙离子浓度，可以用单波长的荧光分光光度计么？

fro-3现在做细胞内钙离子的比较的多，我这边有日立F-4600怎么做的

日立荧光分析在生物研究中的应用
http://www.instrument.com.cn/show/download/shtml/054546.shtml

双激发单发射的实验还是很有挑战的，理想的模型是340、380分别激发，数据采集也同步切换，这样可以通过ratio的方式得到340、380浓度变化，所以好像荧光切换及同步的数据切换是较大的问题。不知道有什么好办法吗

我觉得不行，

发射波长是多少啊，

采用fura-2探针测量钙离子浓度时，必须要求光源波长具备340/380快速切换的功能，且要求专业的测量处理软件。日立分光光度计做着玩玩可以，原则上不能做为实验数据的。能做这方面测量仪器比较混杂，大多数不专业，基本上都是山寨机。国内目前用户较多的是采用滤镜轮系统，即楼上说的采用不停旋转的滤光片来切换波长，340/380机械切换最快40ms/次，激发波长带宽有滤色片决定，不能改变，且光强被减弱，做出数据相对准确但与目前国际上专业测量钙离子浓度测量还是有差距的。在全球范围内，做钙离子测量的厂家最专业的要数美国PTi 了，该厂家DeltRam 光源波长切换速度为，<2ms,检测器不但可以采用传统的CCD,对细胞内钙流变化非常快的样品可以采用PMT检测器，，，共同交流

我们实验室也要用日立f-4600做关于测定细胞内钙离子的浓度，测试方法我还是有些疑惑希望和您讨论一下！
我 邮箱是sunny04141125@163.com希望您回复。