【飞诺美色谱】氨基酸样品反相制备案例

艾杰尔飞诺美

摘要：本实验采用 LC-10F 高压半制备系统，选择 Venusil ASB C18（5 µm, 150 Å, 10×250 mm）对氨基酸样品进行了纯化。结果表明：流动相为 5 mmol/L 七氟丁酸+0.7%TFA 水溶液和乙腈，进行洗脱，能够有效分离，且峰形良好。

关键词：关键词：LC-10F 高压半制备系统；氨基酸样品；Venusil ASB C18

前言

氨基酸样品的普遍检测方法都是衍生化后检测。在实际研究过程中，在动物提取物蛋白水解后，测试其中的氨基酸组成，有可能需要采用非衍生化的方法进行制备，将各个氨基酸分别进行鉴定等工作。本实验建立的制备纯化方法尝试使用简单的流动相体系实现分离，避免使用衍生化等破坏性操作。

实验部分

仪器、试剂与材料

主要仪器设备

LC-10F 高压半制备仪器

试剂材料

水为去离子水，乙腈为制备级

色谱柱：Venusil ASB C18（5 µm，150 Å，10×250 mm）

氨基酸样品：客户提供

样品前处理

样品是无色溶液状态，用 0.22 µm 滤膜过滤后直接上样

制备条件

色谱柱：Venusil ASB C18（5 µm, 150 Å, 10×250 mm）；

流动相：A：5 mM 七氟丁酸+0.7%TFA 水溶液；

B：乙腈；

检测器：ELSD 85 ℃，Gas Flow：2.0 nl/min；

流速：4 mL/min；

进样量：20 µL；

梯度：

结果与讨论

本实验采用 Venusil ASB C18 （5 µm, 150 Å, 10×250 mm）对氨基酸样品进行了分离，由表 1 及图 1 可知，流动相为 5 mM 七氟丁酸+0.7%TFA 水溶液和乙腈，进行梯度洗脱时，样品分离良好。

结论

本实验采 Venusil ASB C18（5 µm, 150 Å, 10×250 mm）色谱柱对氨基酸样品进行了制备。Venusil ASB C18 使用非衍生化的方法分离氨基酸分离效果良好，能够初步分离样品。

附：相关产品

阅读23次

关注