【飞诺美色谱】三磷酸腺苷类样品制备案例

艾杰尔飞诺美

摘要：本实验采用 Agela LC-100F 高压制备色谱仪器，选择 Innoval ODS-2 柱（7 µm，100 Å，21.2×250mm）某三磷酸腺苷类样品进行了制备。结果表明：流动相为 20 mM 碳酸氢铵水溶液和乙腈，进行梯度洗脱，能够有效分离，峰形良好。

关键词：Agela LC-100F 高压制备系统；三磷酸腺苷类样品；Innoval ODS-2 制备柱

前言

样品在 HPLC 填料下使用了大量的磷酸缓冲盐，且样品在制备时峰形较差。需要建立一个合适的使用挥发性缓冲盐制备方法，并改善主成分峰形。

实验部分

仪器、试剂与材料

主要仪器设备

Agela LC-100F 高压制备仪器

试剂材料

去离子水；乙腈为色谱纯；

制备色谱柱：Innoval ODS-2，7 µm，100 Å，21.2×250 mm；

三磷酸腺苷类样品：客户提供。

样品前处理

样品是灰白色固体，取 10 mg 样品加入 1 mL 超声溶解，使用 10%甲酸水溶液调pH 至 5-6，用 0.22 µm 滤膜过滤后上样。

色谱柱：Innoval ODS-2，7 µm，100 Å，21.2×250 mm；

流动相：A：20 mM 碳酸氢铵水溶液；B：乙腈；

流速：18 mL/min；

波长：240 nm；

梯度：

检测条件

色谱柱：Innoval ODS-2，10 µm，100 Å，4.6×250 mm；

流动相：A：20 mM 碳酸氢铵水溶液；B：乙腈；

流速：1.0 mL/min；

检测器：UV 240 nm；

柱温：30 ℃；

梯度：

结果与讨论

本实验采用 Innoval ODS-2 (7 µm，100 Å，21.2×250 mm)三磷酸腺苷样品进行了制备测试，由表2 及图 1 可知，流动相为 20 mM 碳酸氢铵水溶液与乙腈，进行梯度洗脱时，样品通过制备测试，峰形良好。

结论

结果表明 Innoval ODS-2（7 µm，100 Å，21.2×250 mm）填料三磷酸腺苷类样品峰型及分离效果良好，制备接收液可直接冻干。

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