摘要:本实验采用高效液相色谱 (HPLC) 法结合紫外检测器,按照 ChP2015 版一部标准方
法,并选择 Venusil® XBP C18(L)(5 µm,150 Å;4.6 × 250 mm)色谱柱对红景天有关样品进行了
测定。结果表明:在波长为 275 nm,流动相为水︰甲醇=85︰15 (v\v),样品溶剂接近流动相比
例时,主峰峰型较好,理论塔板数以红景天苷计算为 15727>2000,可符合检测要求。
关键词:高效液相色谱法;紫外检测器;红景天苷;Venusil® XBP C18(L)色谱柱
前言
红景天苷多年生草本植物红景天的提取物,它能够通过干扰细胞代谢、改变细胞
外衣的性质抑制肿瘤细胞增殖,同时还能够提高 T 淋巴细胞转化率和吞噬细胞活力,
增强免疫力,抑制肿瘤生长,使白血球升高,抵抗微波辐射等。
表 1.红景天苷样品信息
实验部分
仪器、试剂与材料
试剂材料
屈臣氏水;甲醇为色谱纯;
红景天粉末样品:由某制药集团提供;红景天苷对照品:0.5 mg/mL,由 Agela
laboratory 提供;
高效液相色谱柱:Venusil® XBP C18(L);5 µm,150 Å;4.6 × 250 mm。
样品制备
红景天苷对照品溶液:取红景天苷对照品适量,精密称定,加流动相制成每 1 mL
含 0.5 mg 的溶液,即得。
红景天供试品溶液:取本品粉末约 1.0 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入
甲醇 10 mL,密塞,称定重量,超声处理 30 分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减
失的重量,摇匀,滤过,取续滤液 1.0 mL 加流动相 1.0 mL 稀释,即得。
色谱条件
色谱柱:Venusil® XBP C18(L);5 µm,150 Å;4.6 × 250 mm;
流动相:水︰甲醇=85︰15 (v\v);
流 速:1.0 mL/min;
波 长:275 nm;
柱 温:30℃;
进样量:10 µL。
结果与讨论
本实验采用 Venusil® XBP C18(L)色谱柱对红景天样品进行了测定,由表 2 及图 1、
图 2 可知,在上述色谱条件下,待测物峰形良好。
表 2. 红景天中红景天苷采用不同样品溶剂测试结果
图 1. 红景天苷对照品流动相溶解样品高效液相色谱图
图 2. 红景天供试品流动相溶解样品高效液相色谱图
图 3. 红景天苷对照品纯甲醇溶解样品高效液相色谱图
图 4. 红景天供试品纯甲醇溶解样品高效液相色谱图
结论
本实验按照 ChP2015 版一部中标准方法,采用 Venusil® XBP C18(L)色谱柱(5 μm,
150 Å,4.6 × 250 mm)对红景天有关样品进行了测定。结果表明样品溶剂对主峰峰型影
响较大,使用甲醇做样品溶剂易出现溶剂效应;使用接近流动相比例的溶剂溶解时主峰
峰型较好,理论塔板数以红景天苷计算为 15727>2000,可符合实验要求。
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