摘要:本实验采用高效液相色谱 (HPLC) 法结合紫外检测器,参照 ChP2015 一部槐花-芦丁项下分
析方法,选择 Venusil® XBP C18(L)色谱柱(5 μm,150Å,4.6×250 mm)对槐花中芦丁进行了测试。
结果表明:流动相为 1%醋酸溶液与甲醇,等度洗脱时,测得供试品溶液中理论塔板数以芦丁峰计
算为 5345>2000,能够满足检测要求。
关键词:高效液相色谱法;紫外检测器;槐花;芦丁;Venusil® XBP C18 (L)色谱柱
前言
槐花味苦,性平,无毒,具有清热、凉血、止血、降压的功效。对吐血、尿血、痔
疮出血、风热目赤、高血压病、高脂血症、颈淋巴结核、血管硬化、大便带血、糖尿病、
视网膜炎、银屑病等有显著疗效;还可以驱虫、治咽炎。槐花能增强毛细血管的抵抗力,
减少血管通透性,可使脆性血管恢复弹性的功能,从而降血脂和防止血管硬化。
表 1. 芦丁化学信息
实验部分
仪器、试剂与材料
试剂材料
纯水(屈臣氏);甲醇与醋酸均为色谱纯试剂;
待测样品:某医药公司提供;
高效液相色谱柱:Venusil® XBP C18(L);5 μm,150 Å;4.6×250 mm。
样品制备
称取槐花 0.2 g,置具塞锥形瓶中,加入甲醇 50 mL,称定重量,超声处理 30 min,
放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,量取续滤液 2.0 mL,置 10 mL 容量瓶中,
加 50%甲醇稀释至刻度,混匀,经 0.45 μm 滤膜过滤,取续滤液作为供试品溶液。
称取芦丁对照品 1.0 mg,置 10 mL 容量瓶中,加入 50%甲醇溶解并稀释至刻度,
作为对照品溶液。
色谱条件
色谱柱:Venusil® XBP C18(L);5 µm,150 Å;4.6 × 150 mm;
流动相:1%醋酸溶液︰甲醇=68︰32(v/v);
检测波长:257 nm;
流速:1.0 mL/min;
柱温:30℃;
进样量:10 µL;
结果与讨论
本实验采用 Venusil® XBP C18(L)色谱柱对槐花进行了测试。由表 2 和下图可知,
流动相为甲醇和 1%醋酸溶液,等度洗脱,对供试品溶液中芦丁峰型较好。
表 2. 槐花供试品溶液测试结果
图 1. Venusil® XBP C18(L)色谱柱用于芦丁对照品溶液高效液相色谱图
图 2. Venusil® XBP C18(L)色谱柱用于槐花供试品溶液高效液相色谱图
结论
本实验参照 ChP2015 一部槐花-芦丁项下分析方法,使用 Venusil® XBP C18(L)色
谱柱(5 μm;150 Å;4.6×250 mm),对槐花供试品溶液进行了测试,实验结果表明供试
品溶液中理论塔板数以芦丁峰计算为 5345>2000,能够满足检测要求。
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