摘要:本实验采用高效液相色谱 (HPLC) 法结合紫外检测器,按照 ChP2015 一部稳心颗粒含量测
定项下检测方法,选择 Venusil® XBP C18(L) (5 μm,150 Å,4.6×250 mm)色谱柱对稳心颗粒供试品
溶液进行了测试。结果表明:在波长为 203 nm,流动相使用乙腈和水进行梯度洗脱时,供试品溶液
中的三七皂苷 R1、人参皂苷 Rg1 和人参皂苷 Rb1 峰与相邻杂质峰分离良好;理论塔板数以人参皂
苷 Rg1 峰为 57460>2000,能够满足检测要求。
关键词:高效液相色谱法;紫外检测器;人参皂苷;三七皂苷;Venusil® XBP C18(L)色谱柱
前言
稳心颗粒是卫生部颁布的国家级三类新药。由党参、黄精、三七、琥珀、甘松等组
成,是治疗心律失常的首选药物。
表 1. 人参皂苷相关信息
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
高效液相色谱仪,紫外检测器;
试剂材料
屈臣氏水;乙腈、正丁醇、甲醇为色谱纯;氢氧化钠为分析纯;
稳心颗粒:山东某制药股份有限公司;
高效液相色谱柱:Venusil® XBP C18(L);5 μm,150 Å;4.6×250 mm。
样品制备
供试品溶液的制备:取稳心颗粒适量,研细,称取 1.0g 细粉,放入 250ml 具塞锥
形瓶中,加入 50mL 水饱和的正丁醇溶液,称定重量,浸泡 12h 后超声 1h(频率 40kHz),
放冷,再称定重量,并用水饱和的正丁醇溶液补足减少的重量,摇匀,过滤;精密量取
25mL 滤液,用 2%的氢氧化钠溶液洗涤两次,每次 30mL,弃掉碱液;之后用 30mL 的
正丁醇饱和的水溶液洗涤滤液,弃去洗涤液;之后将正丁醇液蒸干,残渣用甲醇溶解并
定容到 10mL,即得。
实验条件
色谱柱:Venusil® XBP C18(L);5 μm,150 Å;4.6×250 mm;
波 长:203 nm;
柱 温:25 ℃;
流 速:1.0 mL/min;
进样量:10 µL;
流动相:以乙腈为流动相 A,水为流动相 B,按下表中的规定进行梯度洗脱;
表 2. 梯度运行程序
结果与讨论
本实验根据 ChP2015 版一部稳心颗粒含量测定项下分析方法,采用 Venusil® XBP
C18(L)色谱柱对稳心颗粒供试品溶液进行了测试,由表 3 及图 1 可知,待测物峰形良好,
且与附近杂质分离度较好,满足检测要求。
表 3. 稳心颗粒含量测定供试品溶液分析结果
图 1.稳心颗粒含量测定供试品溶液高效液相色谱图
实验结论
本实验根据 ChP2015 一部稳心颗粒含量测定项下分析方法,采用 Venusil® XBP
C18(L)色谱柱(5 μm,150 Å,4.6×250 mm)对稳心颗粒供试品溶液进行了测试。结果表
明色谱柱对含量测定供试品溶液中三七皂苷 R1、人参皂苷 Rg1 和人参皂苷 Rb1 峰分离
效果较好,理论塔板数以人参皂苷 Rg1 峰计算为 57460>2000,能够满足检测要求。
附:相关产品
【飞诺美色谱】水中 15 种多环芳烃的分析方法
【飞诺美色谱】大鼠血浆中芬太尼的分析方法
IVT转录过程中NTPs和帽子类似物残留的检测
【飞诺美色谱】卡马西平的分析方法
相关产品
关注
拨打电话
留言咨询