【飞诺美色谱】牛奶中甲砜霉素的分析方法

艾杰尔飞诺美

2024/06/06 19:46

TA的动态

牛奶中甲砜霉素的分析方法

AF10121

应用及技术服务部

摘要：本实验重现了GB 29689-2013，样品经乙酸乙酯提取，Cleanert AQ C18 固相萃取柱净化，

Venusil XBP C18 (L)色谱柱（4.6 × 250 mm，5 μm，150 Å）分离，水和乙腈为流动相进行洗脱，外

标法进行定量。结果表明，甲砜霉素添加量为2.0 mg/kg 时，回收率在90% ~ 100%之间，能够满足

检测要求。

关键词:甲砜霉素；Venusil XBP C18 (L)色谱柱；Cleanert AQ C18；Cleanert PEP

前言

服用甲砜霉素可发生腹痛、腹泻、恶心、呕吐等消化道反应，其发生率在10%以

下；偶见皮疹等过敏反应；早产儿及新生儿中尚未发现有灰婴综合征者。仅有个例报

道有出现短暂性皮肤和面色苍白；本品亦可引起造血系统的毒性反应，主要表现为可

逆性的红细胞生成抑制；白细胞和血小板减少；发生再生障碍性贫血者罕见。

因此通过有效的实验技术手段，对牛奶中的有关甲砜霉素残留进行监控，以确保

消费者对牛奶消费的安全具有重要意义。

本实验通过优化前处理方法建立了甲砜霉素在牛奶中的高效液相色谱的检测方

法。

实验部分

仪器、试剂与材料

主要仪器设备

高效液相色谱仪（紫外检测器）；

博纳艾杰尔 12 位负压SPE 装置。

试剂材料

乙酸乙酯、乙腈、正己烷为色谱纯；实验用水为超纯水；甲砜霉素标准品（纯度99%）；

一次性无菌注射器；PTFE-Q针式过滤器(0.45 μm，直径13 mm)；

Cleanert AQ C18固相萃取柱：500 mg/3 mL

Cleanert PEP固相萃取柱：200 mg/6 mL。

样品制备

样品提取

称取牛奶5 g于50 mL离心管中，加乙酸乙酯20 mL,振荡10 min，4000 r/min离心5 min,取上清液于鸡心瓶中，残渣加乙酸乙酯20 mL,重复提取一次，合并两次提取液，于45℃旋蒸至近干，加水5 mL于鸡心瓶中，超声5 min充分溶解，转至50 mL离心管中，再加水5 mL于鸡心瓶中重复溶解后转至同一离心管中。加20 mL正己烷，振荡5 min，4000 r/min离心2 min，取下层液待净化。

样品净化

先将小柱分别用5 mL乙腈，5 mL水溶液活化平衡，然后将待净化液过柱，弃去全部流出液并挤干，最后用5 mL乙腈洗脱。收集洗脱液于45℃氮气吹干，用1 mL水溶解残留物，过0.45 μm PTFE-Q针式过滤器后待测。

以上净化步骤可用卓睿全自动固相萃取仪完成。

实验条件

液相条件

色谱柱：Venusil XBP C18 (L)，5 μm，150 Å，4.6 × 250 mm

流动相：乙腈︰水=20︰80

柱温：35℃

进样量：20 μL

检测波长：225 nm

结果与讨论

实验结果