摘要：本实验采用高效液相色谱法结合紫外检测器，参照中国药典 2015 年版 二部甲钴胺胶囊
有关物质项下方法，分别使用 Venusil® C18 Plus、Venusil® MP C18 色谱柱(5 µm，4.6 × 250 mm)
对供试品溶液进行分析测定。结果表明：在波长为 342 nm，流动相为 0.03 mol/L 磷酸二氢钾溶
液(pH4.5)︰乙腈=83︰17(v/v)时，两款色谱柱对甲钴胺的保留时间约为 12 min，与相邻杂质分
离度大于 1.5，均可满足药典要求，可用作甲钴胺胶囊有关物质分离分析。
关键词：高效液相色谱法；紫外检测器；甲钴胺胶囊；Venusil® C18 Plus；Venusil® MP C18
前言
甲钴胺是一种内源性的辅酶 B12，参与一碳单位循环，在由同型半胱氨酸合成蛋
氨酸的转甲基反应过程中起重要作用。体外研究表明，甲钴胺可促进培养的大鼠组织中
卵磷脂的合成和神经元髓鞘形成。
表 1. 甲钴胺样品信息
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
高效液相色谱仪，紫外检测器；
试剂材料
屈臣氏水；乙腈为色谱纯；磷酸二氢钾为分析纯；
甲钴胺胶囊：由某医药公司提供；
高效液相色谱柱：Venusil® C18 Plus ；5 µm，120 Å；4.6 × 250 mm；
Venusil® MP C18 ；5 µm，100 Å；4.6 × 250 mm。
色谱条件
色谱柱 1：Venusil® C18 Plus ；5 µm，120 Å；4.6 × 250 mm；
色谱柱 2：Venusil® MP C18 ；5 µm，100 Å；4.6 × 250 mm；
流动相：0.03 mol/L 磷酸二氢钾溶液(pH4.5)︰乙腈=83︰17(v/v)；
波 长：342 nm；
流 速：1.2 mL/min；
进样量：20 µL；
温 度：45℃。
结果与讨论
本实验参照中国药典 2015 年版 二部甲钴胺胶囊中有关物质项下方法，分别使用
Venusil® C18 Plus、Venusil® MP C18 色谱柱对甲钴胺胶囊供试品溶液进行检测，由表 2
及图可知，在上述色谱条件下， 甲钴胺保留时间约 12 min，与相邻杂质分离度为 2.78、
3.38。
表 2.甲钴胺胶囊供试品溶液实验数据
图 1. Venusil® C18 Plus 色谱柱用于甲钴胺供试品溶液高效液相色谱图
图 2. Venusil® C18 Plus 色谱柱用于甲钴胺供试品溶液高效液相色谱图(纵坐标局部放大)
图 3. Venusil® MP C18 色谱柱用于甲钴胺供试品溶液高效液相色谱图
图 4. Venusil® MP C18 色谱柱用于甲钴胺供试品溶液高效液相色谱图(纵坐标局部放大)
结论
本实验参照中国药典 2015 年版 二部甲钴胺胶囊有关物质项下方法，分别使用
Venusil® C18 Plus、Venusil® MP C18 色谱柱对甲钴胺胶囊供试品溶液进行检测，结果表
明在上述实验条件下，Venusil® C18 Plus、Venusil® MP C18 色谱柱结果均满足药典要求，
可用于甲钴胺胶囊有关物质的检测。
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