前言
嗜铬细胞瘤及副神经节瘤（PPGL）是一种能够引起内分泌
性高血压的少见神经内分泌肿瘤，在普通高血压门诊中患病率为
0.2% - 0.6%，在儿童高血压患者中为1.7%。PPGL患者的主要临床
表现为儿茶酚胺（catecholamine，CA）类物质分泌增多，进一步
导致高血压及心、脑、肾血管并发症和代谢性改变，在经准确诊
断后，可通过手术治疗，属于一种可治愈的继发性高血压。
CA是一类含有儿茶酚和胺基的神经类物质，是人体内重要的
神经递质和激素，包括肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)和多巴胺
（DA）。CA在儿茶酚-O-甲基转移酶（COMT）的作用下生成变肾
上腺素类物质（metanephrines，MNs），主要包括甲氧基肾上腺
素(MN)、甲氧基去甲肾上腺素(NMN)和3-甲氧酪胺(3-MT)。在《嗜
铬细胞瘤和副神经节瘤诊断治疗的专家共识（2020）》中，推
荐：诊断PPGL的实验室检查首选血浆游离或尿液甲氧基肾上腺素
(MN)、甲氧基去甲肾上腺素(NMN) 浓度测定；建议：可同时检测血
或尿NE、E、DA及其他代谢产物3-MT等浓度以帮助诊断。并且，
鉴于质谱法灵敏度高、专属性强、稳定性好等特点，专家共识中
推荐首选使用LC-MS/MS法测定MNs。
本方法基于SCIEX 液相色谱串联质谱系统，采用同位素内标校
正法，建立了一次处理，同时准确检测血浆中6种儿茶酚胺类物质
的定量方法。各化合物信息如下。
实验部分
样品前处理
本实验采用SPE固相萃取法对血浆中6种儿茶酚胺类进行处理。
色谱条件
色谱柱：Kinetex F5（2.6 µm, 3.0×100 mm）；
流动相：A含甲酸的水溶液，B含甲酸的甲醇，梯度洗脱；
流速：0.4 mL/min；
柱温：40 ℃；
质谱条件
电离方式：电喷雾离子源，正离子；
检测方式：多反应监测 (MRM)；
离子源温度 (TEM)：500℃;
雾化气 (Gas1)：60 psi;
辅助气 (Gas2)：40 psi；
气帘气 (Gurtain Gas)：30 psi;
电喷雾电压：1500V；
对应MRM通道及参数见表1。
表1. 质谱参数
结果与讨论
在本实验条件下，各化合物得到有效分离，典型色谱图如图1。
标准曲线
以水为替代基质，制作标准工作曲线。各待测物典型标准曲
线结果如下表。
加标回收率
取混合人血浆样本，分为4组，向其中三组加入不同浓度的6
种儿茶酚胺混合标准溶液，制备低、中、高三组血浆加标样本，
以随行标曲测定4组血浆样本中各化合物浓度。按下述公式计算加
标回收率。
加标回收率=(实测加标后样本浓度-实测加标前样本浓度)/理论
加标浓度
各化合物在各自加标水平下加标回收率结果如下图所示。各
待测物的加标回收率在92.2%-112.1%之间，符合相关要求。
精密度
取混合人血浆样本，分为 3 组，向其中加入不同浓度的 6 种儿茶酚胺混合标准溶液，
制备低、中、高三组血浆加标样本（QC）。各浓度 4 样本分析，连续测定 3 天。根据当
日的标准曲线，计算 QC 样本浓度。根据 QC 的 RSD%对方法的日内与日间精密度进行考
察。结果下图所示。各化合物的日内和日间精密度分别为 0.7-6.0%和 2.9-9.4%，符合相关
相关要求。
总结
本实验在 SCIEX 液质连用平台上，搭建了一针进样，6 种儿茶酚胺类化合物同时定量
检测方法。实验采用 SPE 法进行样本前处理，同位素内标校准，对血浆中 6 种儿茶酚胺
类化合物定量分析。方法线性良好，加标回收，日内、日间精密度满足相关要求。可用于
临床实际样本的检测。
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