【飞诺美色谱】血浆中司美格鲁肽与替尔泊肽药物的测定

胰高血糖素样肽 -1(GLP-1)激动剂被认为是未来几年最具市场增长潜力的一类糖尿病药物。司 美格鲁(Semaglutide,又称索马鲁肽)和替尔泊肽(Tirzepatide,又称替西帕肽),作为新一代 的 GLP-1 药物,不仅可以刺激体内胰岛素的释放,有效地控制血糖水平,同时可以抑制胃肠蠕动, 增加饱腹感,抑制食欲。它们在降糖、减重、心血管收益、安全性等方面均展现出良好的临床优势。 本文建立了一种血浆中索马鲁肽和替尔泊肽药物的测定方法,为药物安全性和治疗效果的进一步 研究提供科学依据。
样品制备
预处理:
200 μL 血浆,加入 400 μL 甲醇蛋白沉淀,15000 g/5min 离心取 500 μL 上清,再加入 400 μL 水稀释, 涡旋混匀,待净化。
固相萃取 (SPE):
前处理耗材:Cleanert 多肽检测专用板 3 (5 mg/1 mL/Well) 货号:Peptide-3-MW
前处理仪器:Cleanert M96 生物样品前处理仪 货号:SPE-M96
活化:依次使用200 μL甲醇、200 μL水活化 上样:加载预处理后的血浆至活化后微孔板 淋洗:使用 500 μL 水淋洗微孔板
洗脱:用50 μL洗脱液(5%甲酸乙醇:水=4:1)洗脱2次,涡旋混合,待检测。
液相条件
质谱条件
色谱柱:Aeris peptide XB-C18 规格:2.1×100 mm ,2.6 μm 货号:00D-4505-AN
流动相:A: 0.1% 甲酸水溶液
B: 0.1% 甲酸乙腈溶液
流速:0.3 mL/min 柱温:40 ℃
进样量:5 μL 时间 (min) A (%)       B (%)
梯度程序见表2  
离子源类型:电喷雾离子源(ESI+)
扫描方式:多反应监测正负离子模式(MRM) 喷雾针电压:喷雾针电压:5500 V
离子源温度:离子源温度:450 ℃
加热器(GS1):加热器(GS1):60 psi
辅助加热气(GS2):辅助加热气(GS2):60 psi 气帘气(CUR):气帘气(CUR):30 psi
碰撞气(CAD):碰撞气(CAD):High
结论
本实验建立了血浆中索马鲁肽 (Semaglutide) 和替尔泊肽 (Tirzepatide) 的定量方法,LQD 可以做到 0.5 ng/mL, 线性范围 0.5 ng/mL~200 ng/mL,外标法回收率均在 80% 以上。


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