【飞诺美色谱】福美胂的分析方法

艾杰尔飞诺美

2024/09/09 11:54

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概述

本实验以1%甲酸水和乙腈为流动相，使用Kinetex C8 （2.1×50mm 2.6μm）色谱柱对福美胂进行测试，出峰可达要求。

关键词

Kinetex C8；福美胂

化合物信息

实验部分

3.1仪器、试剂与材料

3.1.1主要仪器设备

液相色谱串联质谱仪(AB SCIEX API 5500+)，配有电喷雾离子源(ESI)；

3.1.2试剂材料

实验用水为屈臣氏水；乙腈为色谱纯试剂；甲酸为分析纯。

3.1.3样品

1. 样品：由客户提供；

2.上机液：称取福美胂标品3.0mg于棕色进样小瓶中，用0.1%甲酸水-乙腈（2:8）定容到1mL （3.0mg/mL）；

3.2仪器检测条件

3.2.1色谱条件

色谱柱：Kinetex C8 2.1×50mm 2.6μm；

P/N：00B-4497-AN

流动相：A：1%甲酸水；

B：乙腈

流速：0.50 mL/min；

柱温：40 ℃；

进样量：10μL；

梯度程序见表2：

3.2.2质谱条件

离子源类型：电喷雾离子源（ESI）

扫描方式：多反应监测正离子模式（MRM+）

喷雾针电压：5500 V

离子源温度：550 ℃

加热器（GS1）：55 psi

辅助加热气（GS2）：55 psi

气帘气（CUR）：25 psi

碰撞气（CAD）：10 psi

为获得较好的稳定和灵敏度，各化合物监测离子对的去簇电压（DP）和碰撞电压（CE），目标化合物定量离子对参数经过系统优化，优化信息参见表3。

3.3结果

3.4实验谱图

3.5讨论

通过实验发现福美胂在质谱上响应很低，配置大浓度福美胂时才会有一个比较好的响应。上机配置液选择时试验了0.1%甲酸水-乙腈（8:2）、纯乙腈、 0.1%甲酸水-乙腈（1:9）、0.1%甲酸水-乙腈（2:8）、 0.1%甲酸水-乙腈（3:7）等条件，发现溶解粉末状样品时水相大于20%样品不溶解，而有机相占比高上样会出现溶剂效应，所以选用0.1%甲酸水-乙腈（2:8）作为溶液上机。

流动相选择时尝试水-乙腈、0.1%甲酸水-乙腈、 0.5%甲酸水乙腈、1%甲酸水-乙腈及2%甲酸水乙腈，实验发现增加甲酸含量可以改善峰型，但2%甲酸水会影响福美胂的响应，而1%甲酸水可以改善福美胂峰型同时保证福美胂有一个很好的响应。

实验尝试了Venusil MP C18、Luna Omega C18、 Kinetex C18 、Kinetex F5、Luna C8及Kinetex C8，由图（1~6）可知Kinetex C8在同样0.1%甲酸水条件下峰型最好。之后通过调节甲酸含量，由图（7~10）可知1%甲酸水可以提供很好的峰型。

以下为调节流动相甲酸含量质谱图

结论

本实验以1%甲酸水和乙腈为流动相，使用Kinetex C8（2.1×50mm 2.6μm）色谱柱对福美胂进行测试，出峰可达要求。

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