摘要:本实验采用Octopus-Plus高压制备系统, 选择Luna C18-3(10 µm,100 Å)填料对替尔 泊肽样品进行了纯化。结果表明:样品在220 nm 下,流动相为乙酸铵水溶液和乙腈,进行洗脱, 能够有效分离。
关键词:Octopus-Plus;替尔泊肽;Luna C18(3)色谱柱
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
Octopus-Plus 高压制备系统
试剂材料
乙酸铵和乙腈为色谱纯;水为屈臣氏蒸馏 水
高效液相色谱柱:Luna C18(3) 10µm 100 Å 10×250mm,P/N:00G-4616-N0
替尔泊肽样品:客户提供
样品前处理
取样品120mg,加5mL DMSO溶解,再 用5mL水:乙腈=1:1溶液稀释。
制备条件
色谱柱:Luna C18(3) 10 µm 100Å 10×250mm;
流动相:A:水(10mM乙酸铵)
B:乙腈:水=80:20(10mM 乙酸铵)
检测器:220 nm(红色信号线);
280nm(蓝色信号线)
流 速:5.0 mL/min
进样量:10 mL
梯 度:
纯度检测条件:
色谱柱:Luna C18(2) 5 µm 100Å 4.6×250mm;
流动相:A:水 (0.1%TFA)
B:乙腈(0.1%TFA)
检测器:220 nm
流 速:1.0 mL/min
进样量:30 µL
梯 度:
结果与讨论
本实验采用Luna C18(3) 10 µm 10×250mm制备柱对替尔泊肽样品进行了纯 化,由图1可知,流动相为乙酸铵水溶液和乙 腈,进行洗脱,样品通过纯化,可以达到纯化 目的。
结论
本实验采用Luna C18(3) 10 µm 10×250mm对替尔泊肽样品进行了分离纯化, 由图1可知,样品通过制备,分离效果良好。
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