柑橘黄是以甜橙的果实为原料的天然色素。它的成分有柑橘黄素、叶黄素、叶红素、胡萝卜素及类胡萝卜素等。柑橘黄是一种相对比较安全的色素,使用范围广。但也需按生产需要适量使用。
根据GB 1886.346-2021,柑橘黄的鉴别方法为薄层色谱法,色价的测定为分光光度法。主要步骤如下:
1.柑橘黄的鉴别
称取质量相当于0.8g,色价为30的试样,加入10mL正已烷溶解,混匀,在约3000r/min条件下离心约10min,取上清液5μL,用赫施曼minicaps点样毛细管点样于硅胶薄层色谱板(预先在110℃干燥1h),置于展开剂中展开。当溶剂前沿上升至距原点约10 cm时,取出薄板,在空气中干燥。薄板上至少有2个黄色斑点,Rf值为0.7~0.8。干燥后在呈现的斑点使用亚硝酸钠溶液和硫酸溶液喷雾,斑点应消失。
薄层层析对上样量要求均匀且准确。如果毛细管的口径不均匀,点样量差异较大,条带迁移快慢不同,会导致结果不稳定。如果点样斑过大,则容易导致极性相近的物质无法完全分离。
赫施曼minicaps毛细管,有肝素化和非肝素化两种可选,体积有0.5μL到100μL多种规格,以激光和自动化控制技术制作,精度高、重复性好,确保每根毛细管都在0.5%精度以内,已为多个知名薄层扫描仪贴牌生产点样耗材,如瑞士卡玛(CAMAG)、德国迪赛克(Desaga)等。
2.柑橘黄色价的测定
①测定
称取试样1g,精确至0.0002g,加入正己烷溶解并定容至100mL,摇匀后过滤。用Miragen电动移液器移取滤液2mL,用正己烷定容至100mL,摇匀。取此试液置于1cm比色皿中,以正己烷为空白,在420nm~455nm范围内的最大吸收波长处测定吸光度(吸光度值应控制在0.3~0.7,否则应调整试液浓度,再重新测定吸光度)。
②计算
试验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与算术平均值的比值不大于2.5%。
实验室移取几微升到几毫升的液体,一般采用移液器(手动和电动两种)。手动移液器需要手转旋钮调节数值,手指按压和回松进行排液和吸液。Miragen电动移液器,数值靠设定或选定,电机控制活塞运动。而且吸液和排液可分次数且各段体积可调,可实现单吸多排、多吸单排等效果,具有步骤少、更稳定、调数快、模式多等诸多优势。
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