用紫外可见分光光度计分析核酸的熔化温度和热力学参数

2023/06/01   下载量: 0

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应用领域 材料
检测样本 天然高分子材料
检测项目
参考标准 /

本应用说明报告了对一个核酸样品的熔化温度和热力学参数的评价。使用V-700系列紫外可见分光光度计和PAC-743自动6/8位样品池更换器测量260 nm处的吸光度,该计可以同时测量8个样品。 关键词:Oligonucleotide therapeutic, oligonucleotide, nucleic acid, thermodynamic parameter, enthalpy, entropy, PCR, Southern blot, intracellular environment, molecular crowding

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近年来,衍生自核酸如DNA或RNA的基于 oligonucleotide的治疗方法的使用显著增加。由于两个重要因素,它们被认为是下一代药物:首先,它们不仅作用于传统小分子或抗体基础药物靶向的蛋白质,还作用于mRNA和miRNA等功能性RNA;其次,它们可以通过化学合成制造,这意味着它们可以很容易地大规模生产。 oligonucleotide疗法主要基于人工寡核苷酸,人工 oligonucleotide是化学修饰的DNA或RNA,可以提高其在人体内的结构稳定性和对靶分子的亲和力。评估它们和靶分子的相互作用特性并用作药物,优化它们的碱基数量和序列是至关重要的。因此,检查和评估方法对优化这些性能的重要性已经得到了很好的定义。热力学性质的重要性已经得到强调,因此需要一种有效的方法来分析这些特性。

本应用说明显示,PAC-743可同时测量多个样本,同时准确监测温度。此外,可以通过使用DNA熔融分析程序计算Tm、∆H°和∆S°来评估核酸的热稳定性和复合物的稳定性。不用说,Tm的评估在PCR(聚合酶链式反应)和Southern印迹的使用中也很重要,这是复制或检测DNA的常用方法。此外,Tm和热参数的评估是估计分子拥挤环境下复合物形成的关键,分子拥挤环境是细胞内环境的伪环境,也一直受到关注。

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