HPLC 中的采样频率、响应时间和柱外效应

2024/09/13   下载量： 0 次

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本应用说明旨在更详细地探讨这些考虑因素，并根据该领域当前的研究和技术进步提供见解和建议。但需要权衡：色谱图采样不足是危险的，因为信息损失是永久性的。相反，过采样是不必要的，因为它会捕获更多的电子噪声并使文件大小变大。还应考虑其他因素，例如响应时间和柱外体积，以充分利用给定的色谱仪。

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采样频率通常以赫兹 （Hz） 或采样间隔（以秒为单位）测量，分别表示每秒收集的数据点数或每个数据点之间的时间间隔。目前，一些 HPLC-UV 检测器可以提供高达 160-250 Hz 的采样频率，分析人员往往更喜欢更高的采样率。五十年来，出现了不同的观点，但全面的视角仍然难以捉摸。分析化学家通常使用每个峰 15-20 个数据点的启发式方法进行准确定量。本综述将 Nyquist-Shannon 采样定理与色谱数据联系起来，强调了适当的采样速率对于捕获关键特征而不会产生失真、不必要的噪音和过采样的重要性。结果表明，即使是超高效色谱图的大多数特征也具有相对低频的成分。因此，100 Hz 足以实现所有快速和超高效分离。过采样还会增加不需要的噪声。同样，另一个令人困惑的概念是采样频率和响应时间之间的欺骗性关系。我们表明它们之间没有联系。非最佳响应时间将影响峰到峰分辨率。此外，还强调了柱外谱带展宽的重要性。如果管道内径从 130 μm 更改为 254 μm，峰值效率损失可能高达 50%。

关键词：HPLC， RHPLC， UHPLC， 色谱

实验JASCO RHPLC 配备脱气机、二元泵、主动混合器 （PU-4180）、带 5 μL 样品定量环的自动进样器 （AS-4150）、柱温箱 （CO-4062） 和光电二极管阵列检测器 PDA （MD 4010），流通池体积为 2.8 μL。流通池是半微量 SP 流通池。

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佳士科商贸有限公司
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