方案摘要
方案下载应用领域 | 化妆品 |
检测样本 | 美容/修饰类化妆品 |
检测项目 | |
参考标准 | 《化妆品安全技术规范》(2015版) |
苯酚、氢醌具有一定美白、祛斑的功效,但由于其具有很大的毒性和刺激性,长时间使用会引起皮肤病变和全身性副作用。研究表明,苯酚属高毒类化合物,对细胞有直接毒害作用,能使黏膜、心血管和中枢神经系统受到腐蚀、损害和抑制;而氢醌可对许多系统及器官产生毒害作用,具有作用机制多、遗传后果多的特点。我国《化妆品安全技术规范》中规定美白祛斑类化妆品中禁用苯酚和氢醌。
【仪电分析】化妆品中苯酚、氢醌的测定-液相色谱法
苯酚、氢醌具有一定美白、祛斑的功效,但由于其具有很大的毒性和刺激性,长时间使用会引起皮肤病变和全身性副作用。研究表明,苯酚属高毒类化合物,对细胞有直接毒害作用,能使黏膜、心血管和中枢神经系统受到腐蚀、损害和抑制;而氢醌可对许多系统及器官产生毒害作用,具有作用机制多、遗传后果多的特点。我国《化妆品安全技术规范》中规定美白祛斑类化妆品中禁用苯酚和氢醌。
本方案参考《化妆品安全技术规范》中2.26 氢醌、苯酚 第三法:高效液相色谱法,本方法适用于祛斑类化妆品和香波中氢醌、苯酚含量的测定。
一、方法原理
样品中氢醌、苯酚经甲醇提取,用高效液相色谱仪分离,紫外检测器检测,根据保留时间定性,峰面积定量。
二、主要仪器及试剂
a.高效液相色谱仪:LC220,配备紫外检测器;
b.自动进样器:AS2000;
c.色谱柱:C18,4.6mm×250mm,粒径为5µm;
d.分析天平;
e.超声波清洗机;
f.甲醇:色谱纯;
g.氢醌、苯酚混合标准溶液:ρ=1000 μg/mL,有证标准溶液。
三、实验方法
3.1 参考色谱条件
色谱柱 | C18(250mm×4.6mm×5μm) | 流 速 | 1.0mL/min | ||
波 长 | 280nm | 柱 温 | 室温 | 进样量 | 5μL |
流动相 | 甲醇:水=60:40 |
3.2 标准曲线的绘制
取5个洁净的1ml容量瓶,预先加入适量的甲醇溶液,分别移取0μL、10μL、50μL、100μL、200μL的混合标准溶液,然后用甲醇定容至刻度线。配制成含氢醌和苯酚的质量浓度分别为0.0mg/L、10.0mg/L、50.0mg/L、100mg/L、200mg/L 的混合标准系列溶液。按照仪器参考条件,由低浓度到高浓度依次进样分析,以目标化合物的浓度为横坐标,对应的峰面积为纵坐标,绘制工作曲线。
3.3 样品预处理
称取样品1g(精确到0.001g)于具塞比色管中,必要时在水浴上蒸馏除乙醇等挥发性有机溶剂,用甲醇定容至10mL,常温超声提取15min,取上清液经0.45μm滤膜过滤,滤液作为样品待测溶液。
四、实验结果
4.1 标准工作曲线
苯酚的标准工作曲线如图1所示,氢醌的标准工作曲线如图2所示:
图1 苯酚标准工作曲线
图2 氢醌标准工作曲线
4.2标准样品色谱图
浓度为200mg/L的混合标准溶液的色谱图如图3所示:
图3 浓度为200mg/L的混合标准溶液色谱图
4.3 样品色谱图
样品经前处理,按照仪器参考条件分析测定,色谱图如图4所示:
图4 样品色谱图
4.4 结果计算
式中:w—样品中氢醌或苯酚的质量分数,μg/g;
m—样品取样量,g;
ρ—从标准曲线得到待测组分的质量浓度,mg/L;
V—样品定容体积,mL。
4.5 实际样品测试
对市面上某化妆品进行分析测定,测试结果未检出。
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