【仪电分析】茶叶中茶多酚的检测-分光光度法

2022/02/21   下载量: 6

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应用领域 食品/农产品
检测样本 茶叶
检测项目 营养成分>茶多酚
参考标准 GB/T 8313-2018茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法

茶多酚(Tea Polyphenols)是茶叶中多酚类物质的总称,包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等,研究表明茶多酚等活性物质具解毒和抗辐射作用。本实验参考国家标准GB/T 8313-2018《茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法》,适用于茶及茶制品中儿茶素类和茶多酚含量的测定。

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仪电分析茶叶中茶多酚的检测-分光光度法

茶多酚(Tea Polyphenols)茶叶中多酚类物质的总称,包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等,研究表明茶多酚等活性物质具解毒和抗辐射作用。本实验参考国家标准GB/T 8313-2018《茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法》,适用于茶及茶制品中儿茶素类和茶多酚含量的测定。

一、方法原理

茶叶磨碎样中的茶多酚用70%的甲醇在70℃水浴上提取,福林酚(Folin-Ciocalteu)试剂氧化茶多酚中-OH基团并显蓝色,最大吸收波长 λ为765nm,用没食子酸作校正标准定量茶多酚。

二、主要仪器及试剂

a. 紫外分光光度计:L9

b. 分析天平;1645408946(1).jpg

c. 水浴锅;

d. 离心机;

e. 甲醇;

f. 碳酸钠;

g. 甲醇水溶液(体积比):7+3;

h. 福林酚(Folin-Ciocalteu)试剂

i. 10%福林酚(Folin-Ciocalteu)试剂(现配):将20mL福林酚(Folin-Ciocalteu)试挤(h)转移到200mL容量瓶中,用水定容并摇匀。

j. 7.5% Na2CO3(质量浓度):称取37.50g±0.01g Na2CO3,加适量水溶解,转移至500mL容量瓶中,定容至刻度,摇匀(室温下可保存1个月)。

k. 没食子酸储备溶液(1000μg/mL称取0.110g±0.001g没食子酸(GA,相对分子量188.14),于100mL容量瓶中溶解并定容至刻度,摇匀(现配)。

l. 没食子酸工作液:用移液管分别移取1.02.03.04.05.0mL的没食子酸标准储备溶液于100mL容量瓶中,分别用水定容至刻度,摇匀,浓度分别为102030,4050μg/mL

三、实验方法

3.1供试液的制备

称取0.2g(精确到0.0001g)均匀磨碎的式样于10mL离心管中,加入在70℃中预热过的70%甲醇溶液5mL,用玻璃棒充分搅拌均匀湿润,立即移入70℃水浴中,浸提10min(隔5min搅拌一次),浸提后冷却至室温,转入离心机在3500r/min转速下离心10min,将上清液转移至10mL容量瓶。残渣再用5mL70%甲醇溶液提取一次,重复以上操作。合并提取液定容至10mL,摇匀。

移取上述溶液1.0mL100mL容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀,待测。

3.2 测定

用移液管分别移取没食子酸工作液、水(用作空白对照)及测试液各1.0mL于刻度管内,在每个试管内分别加入5.0mL的福林酚(Folin-Ciocalteu)试剂,摇匀,反应3min~8min内,加入4.0mL7.5% Na2CO3溶液,加水定容至刻度、摇匀。室温下放置60min。用10nm比色皿、在765nm波长下用分光光度计测定吸光度(A)。

根据没食子酸工作液的吸光度(A)与各工作液的没食子酸浓度,制作标准曲线。

四、实验结果

4.1计算公式

比较试样和标准工作液的吸光度,按下式计算:


茶多酚%=1645409120(1).jpg

式中:

A—样品测试吸光度;
  V—样品提取液体积,10mL;

d—稀释因子(通常为1mL稀释成100mL,则其稀释因子为100);
  SLOPEstd
—没食子酸标准曲线的斜率;
  m—样品干物质的含量,%;
  A—样品测试吸光度;                

m1—样品质量,单位为克(g)。

4.2 注意事项

  样品吸光度应在没食子酸标准工作曲线的校准范围内,若样品吸光度高于50μg/mL浓度的没食子酸标准工作溶液的吸光度,则应重新配制高浓度没食子酸标准工作液进行校准。


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