化妆品中雌三醇等7种激素的测定

2024/04/16   下载量: 0

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应用领域 化妆品
检测样本 美容/修饰类化妆品
检测项目
参考标准 化妆品安全技术规范( 2015版)

本文建立了 化妆品中雌三醇等 7种激素测定 的 HPLC方法。参照 化妆品安全技术规范( 2015版)中的色谱条件 并 进行优化 ,采用色谱柱 ShimNex CS C18 对 雌三醇等 7种激素 进行 分析 结果显示各组分峰形和重现性良好, 满足检测 要求。 此方法可 为 化妆品中雌三醇等 7种激素 的测定 提供参考。

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1. 实验部分

1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20A高效液相色谱仪;

色谱柱:ShimNex CS C185 μm4.6×250 mmP/N380-01230-01);

SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器(P/N380-00341-05);

LC/MS认证样品瓶LabTotal VialP/N227-34001-01); 

SHIMSEN Pipet移液枪:SHIMSEN Pipet PMII-10P/N380-00751-02);

SHIMSEN Pipet PMII-100P/N380-00751-04);

SHIMSEN Pipet PMII-1000P/N380-00751-06);

 1.2 对照品溶液的制备

混合对照品储备溶液,浓度如下:

 序号 

化合物 

CAS 

浓度 (ug/mL) 

1 

雌三醇

27503-81-7 

30 

2 

雌二醇

150-13-0 

30 

3 

己烯雌酚

5466-77-3 

30 

4 

雌酮

118-60-5 

30 

5 

睾丸酮

118-56-9 

1 

6 

甲基睾丸酮

103597-45-1 

1 

7 

黄体酮

187393-00-6 

1 

 混合对照品溶液:将上述的储备溶液用甲醇稀释10倍,即得。

1.3 分析条件

色谱柱:ShimNex CS C185 μm4.6×250 mmP/N380-01230-01

柱温:50

检测器:PDA, 204/245/254 nm 

流速:0.7 mL/min 

进样量:5 μL 

流动相:水:甲醇= 2575 

2. 实验结果

按照上述色谱条件(1.3)进行采集,混合对照品溶液色谱图如下:

204 nm

峰号 

目标物名称 

保留时间 

峰面积 

峰高 

理论塔板数 

拖尾因子 

分离度 

1 

雌三醇

5.344 

50034 

6410 

9365 

1.158 

-- 

2 

雌二醇

8.156 

1979923 

200393 

14188 

1.112 

11.369 

3 

己烯雌酚

9.085 

54176 

5075 

15232 

1.103 

3.267 

4 

雌酮

9.451 

51825 

4867 

16532 

1.052 

1.243 

5 

睾丸酮

10.575 

59531 

5105 

17706 

1.082 

3.675 

6 

甲基睾丸酮

12.366 

59124 

4438 

18745 

1.064 

5.274 

7 

黄体酮

17.083 

56210 

3230 

21363 

1.049 

11.383 

*以上色谱参数是在254 nm下的数值

混合对照品溶液重现性(254 nm):

化合物 

保留时间(min, n=3 

面积(Area, n=3 







数据1 

数据2 

数据3 

RSD% 

数据1 

数据2 

数据3 

RSD% 


雌三醇

5.344 

5.35 

5.349 

0.06 

50034 

50171 

50274 

0.24 

雌二醇

8.156 

8.166 

8.167 

0.07 

1979923 

1977820 

1970227 

0.26 

己烯雌酚

9.085 

9.094 

9.097 

0.07 

54176 

54399 

54522 

0.32 

雌酮

9.451 

9.46 

9.463 

0.07 

51825 

51718 

51603 

0.21 

睾丸酮

10.575 

10.586 

10.59 

0.07 

59531 

59798 

59692 

0.23 

甲基睾丸酮

12.366 

12.378 

12.384 

0.07 

59124 

59227 

58864 

0.32 

黄体酮

17.083 

17.098 

17.107 

0.07 

56210 

56289 

55960 

0.31 

3. 结论

本文建立了化妆品中雌三醇等7种激素测定的HPLC方法。参照化妆品安全技术规范(2015版)中的色谱条件并进行优化,采用色谱柱ShimNex CS C18,对雌三醇等7种激素进行分析,结果显示各组分分离度良好,峰形和重现性良好,满足检测要求。此方法可为化妆品中雌三醇等7种激素的测定提供参考。


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