小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养实验

2019/04/30   下载量: 11

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应用领域 生物产业
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参考标准 小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养实验

目的: 小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养可应用于:(1)细胞保种;(2)分子生物学研究;(3)基因治疗相关研究。 实验原理: 将小鼠的胚胎成纤维细胞(MEF)从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置MEF生长培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。

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目的:

小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养可应用于:(1)细胞保种;(2)分子生物学研究;(3)基因治疗相关研究。

 

实验原理:

将小鼠的胚胎成纤维细胞(MEF)从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置MEF生长培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。

 

实验步骤:

 

实验材料: 孕鼠

 

试剂 试剂盒:  PBS   EDTA  胰酶   MEF生长培养基   FBS   高糖DMEM

 

仪器耗材: 眼科直剪  眼科直镊  眼科弯镊  玻璃平皿3   尼龙滤网  离心管  手术刀片

 

一、实验材料准备

1.   动物
 

孕期1416天的孕鼠(小鼠)
 

2.   试剂

Ca2+Mg2+PBS(D-PBS)0.05%胰酶、0.53 mmol/L EDTA溶液、MEF生长培养基(高糖DMEM10%FBS)
 

3.  器械
 

眼科直剪3把、眼科直镊3把、眼科弯镊2把、玻璃平皿3套、200目尼龙滤网、50 ml15 ml离心管和手术刀片。以上物品均需要高压灭菌消毒处理。


 

 

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