酵母焦磷酸酶

酵母焦磷酸酶

商品属性：

 产品介绍：

描述：

无机焦磷酸酶（酵母）纯化自重组 E. coli 菌株，携带有从酿酒酵（Saccharomycescerevisiae）克隆的 ppa基因和蟾分枝杆菌（Mycobacterium xenopi）GyrA 内含肽的融合基因。该焦磷酸酶催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐：–4+ H20 →2HP04–2。在核酸扩增实验中，可解除生成的无机焦磷酸盐对反应体系的抑制。
应用：

反转录反应中提高 RNA 产量
增强 DNA 复制
储存：-20°C 可保存 3 年。
活性定义：

1 单位指标准反应条件下（20 mM Tris-HCl，pH7.5，2 mM MgCl2，2 mM PPi，25°C 反应 10 分钟）每分钟催化无机焦磷酸盐生成 1 μmol 磷酸盐所需的酶量。

注意事项：

（1） 该酶在多种反应 Buffer 中均具有活性，通常该酶在HDA 扩增、LAMP 扩增等实验中，可直接接入即可。
（2） 该酶的用量在不同的实验中需要优化，通常在0.05~1 U/ml 浓度调整。
（3） 该酶的最佳反应温度为 25°C，其在 16~37°C 均有活性，65°C 10min 可使该酶失活。  

pcr相关试剂实验结果分析：

PCR实验结果的分析涉及多个方面，‌包括实验操作、‌试剂质量、‌实验条件等，‌这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。‌以下是对PCR实验结果分析的一些关键点：‌

循环次数过多：‌增加模板量减少循环次数，‌缩短退火时间及延伸时间，‌或改用两种温度的PCR循环，‌可以有效避免循环次数过多导致的问题。‌

退火温度过低：‌退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要，‌过低的退火温度可能导致非特异性扩增，‌影响结果的准确性1。‌

电泳体系问题：‌包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、‌凝胶没有凝固好、‌琼脂糖质量差等问题，‌这些都会影响DNA片段的分离效果。‌

试剂盒问题：‌运输储存不当可能引起试剂盒失效，‌试剂盒本身质量问题如引物选择、‌循环参数设置不当也可能导致实验失败1。‌

降解的陈旧模板：‌使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布，‌影响结果的解读1。‌

PCR假阴性结果：‌可能由引物长度不够、‌试剂浓度不标准、‌靶序列突变或缺失、‌循环参数设置错误、‌标本中有Taq酶抑制剂、‌PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。‌

为了获得准确的PCR实验结果，‌需要注意以下几点：‌

确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。‌

在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测，‌以便及时对反应条件进行调整。‌

防止样本的污染和交叉感染，‌以免影响PCR反应的准确性和可靠性。‌

通过上述分析，‌可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素，‌从而提高实验结果的准确性和可靠性。‌

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