大鼠骨骼肌成纤维细胞

大鼠骨骼肌成纤维细胞

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介：

公司实验室分离的大鼠骨骼肌成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠骨骼肌成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞简介：

大鼠骨骼肌细胞分离自四肢肌肉组织；骨骼肌又称横纹肌，肌肉中的一种，约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞，肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌，横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官，有丰富的血管、淋巴分布，在躯体神经支配下收缩或舒张，进行随意运动。肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。依形态命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨状肌等。骨骼肌细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方。肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带（Ⅰ带）及暗带（A带）。明带染色较浅，而暗带染色较深。暗带中间有一条较明亮的线称H线。H线的中部有一M线。明带中间，有一条较暗的线称为Z线。两个Z线之间的区段，叫做一个肌节。骨骼肌细胞也称横纹肌细胞，细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方，细胞多呈梭行，具有一定的方向性。

原代培养原理和应用：

一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞，置于合适的培养基中培养，在无菌、适当温度和一定条件下，使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数，是指细胞培养的次数，从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段，都属原代培养，一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。

二、原代培养细胞直接来源于活体组织，体外培养也尽量模拟体内环境，使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态，可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段，亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

三、原代细胞的质量取决于多个因素：取材、培养条件的优化、无菌操作，特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言，想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍，但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心，已构建细胞培养和实验平台，可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞，并在此基础上提供相关细胞实验服务，包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。
公司正在出售的产品：

Boc-DL-Ala-OH  3744-87-4  C8H15NO4

H-D-Thr-OMe.HCl  60538-15-0  C5H12ClNO3

Boc-Arg(Mts)-OH.CHA  68262-71-5  C20H32N4O6S.C6H13N

H-Met-OH  63-68-3  C5H11NO2S

Fmoc-β- D-HoTyr(tBu)-OH  1233495-02-7  C29H31NO5

Z-Arg(Mtr)-OH.CHA  80745-09-1  C24H32N4O7S.C6H13N

Fmoc-Asparaginol  260450-76-8  C19H20N2O4

Fmoc-Lys(Me3)-OH  201004-29-7  C24H31ClN2O4

Z-His(Dnp)-OH  63013-46-7  C20H17O8N5

Boc-Valinol  79069-14-0  C10H21NO3

Fmoc-Glu-OAll  144120-54-7  C23H23NO6

Z-D-Asp-OH  78663-07-7  C12H13NO6

Boc-Asp(OBzl)-OH  7536-58-5  C16H21NO6

H-D-Trp-OMe.HCl  14907-27-8  C12H14N2O2.HCl

Z-Hyp(tBu)-Ome  146951-99-7  C18H25O5N1

小鼠组织蛋白酶K(CTSK)ELISA试剂盒 ，英文名： CTSK ELISA Kit

绵羊白介素6(IL-6)ELISA检测试剂盒SheepIerleukin6,IL-6ELISAKit 96T/48T

犬胰岛素样生长因子II(IGF2)免疫试剂盒 Dog Insulin-like growth factor II,IGF2 ELISA kit

英文名称Mouseai-alpha-FodrinIgG/IgAELISAKit小鼠alpha-Fodrin抗体IgG/IgAELISA试剂盒规格：96T/48T

玻璃清洁剂(橱窗、大门、汽车玻璃等)500毫升/瓶

RatFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISA试剂盒大鼠FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

大鼠骨骼肌成纤维细胞小鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA试剂盒 ，英文名： α-glucosidase ELISA Kit

大鼠苗条素受体(LR/Ob-R)ELISA检测试剂盒RatLeptieceptor,LR/Ob-RELISAKIT 96T/48T

人N(ε)羧乙基赖氨酸(CEL)免疫试剂盒 Human N(epsilon)(carboxyethyl)lysine(CEL)ELISA kit

英文名称MouseMacrophageInflammatoryProtein-3β,MIP-3βELISAkit小鼠巨噬细胞炎性蛋白-3β(MIP-3β)规格：96T/48T

冰冻切片DNA分离试剂盒50次

RabbitUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISA试剂盒兔尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA试剂盒规格：96T/48T

植物钙调0酸酶(CaN)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human ai perinuclear factor (APF) ELISA Kit 人抗核周因子抗体(APF)ELISA试剂盒

Porcinetumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit 猪坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforADV-IgG(HumanAdenovirusIgG)ELISAKit人腺病毒IgG规格：48T/96T

血液样品固着液(Aceticalcohol固着液)50毫升

MouseSomatostatin,SSELISAKit小鼠生长抑素(SS)ELISA试剂盒规格：96T/48T

贴壁细胞传代操作步骤：

用移液管或者巴氏吸管吸取培养液；

使用不含钙镁离子的平衡盐溶液（PBS）冲洗细胞1-2次；

弃PBS，加入胰蛋白酶-EDTA消化液（消化液浓度根据各细胞不同有调整），轻轻摇晃培养瓶，使胰酶与细胞表面充分接触，37 ℃孵育2-3 min，加入含血清完全培养基终止消化。

将细胞悬液移入离心管中，800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清，加入预热的完全培养基重悬细胞，轻轻吸打混匀，吹打过程中尽量不要出现气泡。

细胞计数，根据细胞量选择合适的传代比例，最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。

 悬浮细胞传代操作步骤：

悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮，无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞损伤较小。悬浮细胞传代，通常有两种方法，直接传代法和离心传代法。

（1）直接传代法

①　悬浮细胞长满至80%-90%左右（细胞悬液变黄，最大细胞密度随细胞系不同而有所差异），即可传代；

②　用吸管吸弃细胞悬液1/2～2/3；

③　加入适量的新鲜培养基，继续培养。

（2）离心传代法

①　将细胞悬液转移到离心管内；

②　800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清；

③　使用新鲜的培养基重悬细胞；

④　吸管吸取适量细胞悬液，装入新的培养瓶，再加入适量的新鲜培养基，继续培养。